1年生の遺伝子操作学実習でプラスミドの調製を行いました。
3回目はプラスミド調製キットを使用して抽出しました。
キットの溶液は、
BufferA1、BufferA2、BufferA3と順番に使用していきます。
原理はアルカリSDS法とだいたい同じなので、前回の操作を思い出しながら行いましょう。
BufferA2には青い色がついています。
この溶液で溶菌します。操作は穏やかに。
BufferA3で中和します。
青い色が消えるまで転倒混和します。
消えたら中和完了です。
遠心します。
上清を取り、Collection Tubeへセットしたカラムへ入れます。
遠心すると、カラムに付いているメンブレンにDNAが吸着します。
エタノールの入っているBufferAQでメンブレンを洗浄・乾燥します。
カラムをマイクロチューブへ移し、溶出液を加えます。
遠心するとメンブレンに吸着していたDNAが溶出されて出来上がりです。
キットを使用すると、あっという間に(カタログによると14分間)プラスミドを調製することができます。
便利ですね(^^♪
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1年生の遺伝子操作学実習でプラスミドの調製を行いました。
今回はアルカリSDS法で抽出します。
プラスミド保有菌をマイクロチューブへ取り、遠心して菌体を集めます。
アルカリSDS法は、
SolutionI、SolutionⅡ、SolutionⅢと順番に入れていきます。
SolutionⅡは溶菌。
SDSにより菌体の細胞膜構造を破壊し、NaOHにより染色体DMAを変性させます。
SolutionⅢは中和。
酢酸カリウムで溶液のpHを中性に戻します。
攪拌すると乳白色のおからのような沈殿が見られます。
遠心します。
沈殿と浮遊している、おからを吸わないように注意しながら、
上清を新しいマイクロチューブへ取ります。
アルコール沈殿を行いプラスミドをペレットにします。
真空デシケーターで乾燥させます。
TEにペレットを溶解したら、プラスミド溶液の出来上がりです。
アルカリSDS法では主に、閉環状DNAが調製できます。
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1年生の遺伝子操作学実習でプラスミドの調製を行いました。
今回はボイル法です。
全培養したプラスミド保有菌をマイクロチューブへ取ります。
遠心して菌体を集めます。
STET、リゾチームを入れて菌体を再浮遊します。
リゾチームは菌体の細胞壁を破壊します。
沸騰水浴中で煮沸(ボイル)します。
遠心すると、菌体の染色体DNAと変性タンパク質が沈殿します。
プラスミドは溶液中の存在します。
沈殿は必要ないので取り除きます。
アルコール沈殿を行うと、核酸は水に溶解していられなくなり、
凝集して沈殿となります。
遠心してプラスミドを回収します。
TEに溶解して、プラスミド溶液の出来上がりです。
ちゃんと調製できたかをアガロースゲル電気泳動で確認します。
矢印の位置で光っているのがプラスミド(DNA)です。
左のレーンはRNAを除去したプラスミド溶液。
右のレーンはRNAを除去していない溶液です。
プラス側に長く伸びて見えるのがRNAです。
バンドが確認できたのでプラスミドが調製出来たようです。
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みなさん、こんにちは。
今日から定期的なブログアップを再開します。
2年生の化粧品学実習ではいろいろなものを作製しています。
本日ご紹介するのは、石鹸づくり。
油脂に塩基を加えて、けん化すると生成されるのが石鹸です。
型に入れて固めます。
アロマキャンドルも作りました。
今年は容器を各自で用意してもらったので。。。
プリンやら、
ワインやら、
個性豊かでした。
ゆったりとした時間が過ごせそうですね(^^♪
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新年あけましておめでとうございます。
今年はへび年ですね。
へびは神の使いで、なにかと縁起がよい生き物です。
へびのように、なが～くよいことが続く年になるといいですね。
今年も応用生物科学科をよろしくお願い申し上げます。
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明けましておめでとうございます。
みなさんは、どんな新年を迎えられましたか？
今年はへび年・・・。
へびをエキゾチックアニマルとして飼育されている方もいらっしゃいますが、
へびは神として崇められることもあり、
人の歴史との関係も深く、縁起のよい動物ともされていますね。
よい意味で太く、長～いへびにあやかりたいものです。
今年も愛玩動物看護学科のブログ、「わんにゃん通信」をよろしくお願い申し上げます。
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みなさん、こんにちは。
今回のバイオインフォマティクス４では、
前回ご紹介したRasMolを使って、
タンパク質の立体構造をグラフィカルに表示した完成版をご紹介します。
少し写真が多いですが、ご了承ください。
最初にRasMolで立体構造データを読み込んだときは、針金状で表示されます。
（例）
コマンド入力によってグラフィカルに変更した結果です。
２年生それぞれが、異なるタンパク質で挑戦しました。
以上です。
細かいところまではわかりにくと思いますが、いろいろと考えながら作成しました。
コマンド入力のため慣れるまでには少し時間が必要ですので、
十分ではありませんが、タンパク質の立体構造の特徴は表すことができたと思います。
２年生のみなさん、お疲れ様でした。
今日で年内の応用生物科学科・愛玩動物看護学科ブログは、終わりです。
みなさま、よいお年をお迎えください。
年明けは、１月１日（水祝）に新年のご挨拶をお届けし、
その後は１月６日（月）より定期的なブログアップを行います。
お楽しみに。
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みなさん、こんにちは。
２年生のバイオインフォマティクスの、２回目のご紹介です。
今回の授業では、
タンパク質の立体構造をグラフィックに表示する、
RasMolというソフトを使用しました。
このソフトは、クリッククリックではなく、
コマンド入力で立体構造をグラフィックに表示していきます。
コマンド入力は慣れない操作ですが、がんばって取り組みました。
最初に取り組んだ立体構造です。
少し慣れてくると、ちょっとした遊び心ですね。
ラベルを名前にしてみました。
最初にRasMolでデータを読み込むと、
タンパク質の立体構造が針金状で表示されます。
これは、ミオグロビンの立体構造が針金状で表示されたものです。
（背景は白色に変更、元は黒色です。）
RasMolを使用して、立体構造をグラフィカルに表示をしていきます。
ちょっとわかりずらいですが、
色をつけたり、リボン状にしたりしていきます。
２年生のみなさん、いかがでしたか。
コマンド入力は大変ですが、実験と同様に１つずつの積み重ねです。
今回はRasMolの練習を兼ねて作成をしてもらいましたが、
次回は課題提出で作成してもらいますので、
コマンドを１つずつ積み重ねてしっかり取り組んでいきましょう。
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みなさん、こんにちは。
去る８月４日（日）に学科試験が、
１１月２３日（土）に実技試験が行われた、
実験動物２級技術者資格認定試験の結果通知が、
１２月２０日（金）に届きました。
今回は６名の受験でしたが、
全員合格しました！！
令和４年度、令和５年度と全員合格を達成できておりませんでしたので、
３年ぶりの全員合格となりました。
合格者のみなさん、おめでとうございます！！
それと、ＫＨさんが成績優秀者表彰を、堂々の専門学校の部 第一位で受賞しました！
こちらも、おめでとうございます！！
受験者のみなさん、中級バイオ技術者認定試験の合格発表は年明けですが、
これでよい年を迎えられますね。
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皆さん、こんにちは♬
10/29に愛玩動物看護学科と応用生物科学科の1年生が、
心肺蘇生法、止血法について学びました。
BLSとは、一次救命処置(Basic Life Support)のことで、
心配蘇生、AEDの使用、気道異物除去法などを指します。
救急救命学科の1年生からBLS、
今回は心肺蘇生法の様子をお伝えします。
班に分かれて、まずは自己紹介です。
心肺蘇生法の一連の流れを見せてもらった後、
ポイントやコツなどを教えてもらいながら実践しました。
まず、倒れている人を発見したら、
安全確認と感染予防に努め、意識の確認をします。
だんだんと大きな声で声かけするのがポイントです。
反応がない場合、119番通報とAEDを周囲の人に依頼します。
救急車到着に時間がかかるため、
胸部と腹部の動きを見て、
10秒以内で確認することが大切です。
普段通りの呼吸がなかったら、胸骨圧迫を開始します。
圧迫位置は胸の真ん中で、1分間に100〜120回のテンポで圧迫します。
作業を変わる場合は、
中断時間は10秒以内です！
目線を前にして、
胸骨圧迫のコツになります。
正しい姿勢で実施すると、疲れにくくなります。
救急車の現場までの到着時間は、年々遅くなってきているのが現状で
そのため、
次回はAEDの使用について、お届けしたいと思います。
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