みなさん、こんにちは。

２年生の生化学実習も最後の実技試験を残して、

今回が最後の実習です。

今回の実習は、糖の定性試験を行いました。

まずは、使用する試薬の調製からです。

協力して調製していきます。

試薬調製後、いよいよ定性試験です。

今回使用する糖は、

キシロース、グルコース、フルクトース、

マルトース、ショ糖、デンプン、

そして対象として、

水の７種類について定性試験を行いました。

番号順が逆ですが、すみません。

７本の試験管にいずれかの糖が入っています。

定性試験により同定していきます。

それでは、定性試験の結果を見ていきましょう。

アントロン試験（糖であれば陽性）の結果です。

糖であれば青緑色になります。

水は糖ではありませんので反応しません。

No.１は反応してないようです。

ベネディクト試験（還元糖であれば陽性）の結果です。

還元糖は赤色沈殿ができます。

No.２、３、４、５に赤色沈殿があるようです。

バールフェズ試験（単糖類であれば陽性）の結果です。

単糖類であれば赤色沈殿ができます。

No.２、３、４に赤色沈殿があるようです。

No.７は白く濁っています。

セリワノフ試験（ケトースであれば陽性）の結果です。

ケトース（ケト基をもつ単糖類）であれが紅色になります。

No.３、６が紅色になったようです。

ビアル試験（ペントースであれば陽性）の結果です。

ペントース（五炭糖）であれば青緑色になります。

No.４が青緑色になったようです。

最後にヨウ素反応（デンプンであれば陽性）の結果です。

デンプンであれば青紫色になります。

No.７が青紫色になったようです。

以上、６種類の定性試験を行い、

試験管７本の同定を行いました。

写真では少しわかりずらいので、

一覧表にしてみました。

一覧表をもとに、

みなさんも同定をしてみてください。

今回使用した糖類です。

単糖類（キシロース、グルコース、フルクトース）、

二糖類（マルトース、ショ糖）、

多糖類（デンプン）、

水

補足：還元性有（単糖類とマルトース）、

ケトース（フルクトース）、

ペントース（キシロース）

みなさん、いかかですか。

７本の試験管を同定できましたか。

それでは答え合わせです。

No.１（水）、

No.２（グルコース）、

No.３（フルクトース）、

No.４（キシロース）、

No.５（マルトース）、

No.６（ショ糖）、

No.７（デンプン）となります。

ショ糖は、フルクトース（ケトース）を含んでいますので、

セリワノフ反応で擬陽性を示します。

２年生のみなさん、次回は実技試験です。

頑張っていきましょう。

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みなさん、こんにちは。

２年生の生化学実習では、

ゲルろ過クロマトグラフィーを行いました。

ゲルろ過クロマトグラフィーは、

カラムクロマトグラフィーに分類されます。

ゲルを詰めたカラムで分離された物質を分取し、

分析を行います。

ゲルろ過クロマトグラフィーは、

分子量の違いによって分離されます。

したがって前回のＳＤＳ－ＰＡＧＥ法と同様に、

物質の分子量を求めることができます。

今回は、アミラーゼ（タンパク質、酵素）の

分子量を求めました。

実習は、カラムにゲルを詰める作業からスタートです。

詰め過ぎも詰め足らずもダメなので慎重に詰めていきます。

次にサンプルを塗布します。

ゲルを乱さないように驚異の集中力発揮中、

慎重に慎重に！！！！！

溶出液（緩衝液）を追加しながら、

分離された物質を分取します。

色付きは分子量マーカーです。

早速、分離が始まりました。

下から青色、赤色、黄色が確認できます。

黄色がすべて溶出されたら終了です。

今回は、１ｍＬずつ分取しました。

分取後、

吸光度測定と今回は試料にアミラーゼを用いましたので、

ヨウ素デンプン反応を行いました。

分取した溶液は、青色、赤色、黄色の溶液になっています。

これらの溶液の吸光度を測定します。

ヨウ素デンプン反応でアミラーゼの確認をします。

デンプン溶液にヨウ素を加えると青紫色になります。

アミラーゼは、デンプンを分解しますので、

アミラーゼが分取された試験管は、青紫色になりません。

試験管立ての中央あたりは色がありません。

この部分にアミラーゼが含まれます。

吸光度測定とヨウ素デンプン反応の結果から、

アミラーゼの分子量を求めます。

分取した試験管の本数が多く、

吸光度測定も大変でしたが、

グラフの作成も大変そうでした。

青紫色にならない試験管がある程度の範囲でありましたが、

ヨウ素デンプン反応も確認ができました。

ちょっと長めの実習になりましたが、

アミラーゼの分子量も求められました。

２年生のみなさん、ゲルを詰める作業からの実習、

お疲れ様でした。

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2年生の細胞工学実習で、

培地調製を行いました。

滅菌された器具をクリーンベンチへ入れて、

調製開始です。

細胞を培養するためのDMEM培地です。

滅菌水へ粉末を入れて、溶解させます。

黄色い溶液ですね。

炭酸水素ナトリウムを加えると、

赤く色が変化します。

抗生物質を添加し、

最後に血清(FBS+CS)を加えます。

調製できたら、ろ過滅菌を行います。

まず、シリンジに培地と空気を入れ、

フィルターが使用できるかチェックします。

培地入りのシリンジにフィルターをつけて、

元のビーカーへシリンジ内の培地をろ過します。

溶液が全部ろ過出来て、

空気が通らなかったらOKです。

使用できないフィルターは内筒が軽く押せたり、

フィルターホルダーの横から培地が出てきたりしちゃいます。

フィルターが使用できるのを確認したら、

滅菌済みの瓶へ培地をろ過していきます。

滅菌が終わった培地の一部をディッシュに取り、

インキュベーターへ一晩おいて、

コンタミチェックをします。

培地が出来たら、

いよいよ細胞を起こします(^^♪

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みなさん、こんにちは。

２年生の生化学実習では、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法を用いて、卵白アルブミンの分子量測定を行いました。

※ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法：ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動法

今回使用した卵白アルブミンは、生化学実習で分離した卵白アルブミンです。

まずは、ポリアクリルアミドゲルの作成です。

ポリアクリルアミドゲルを電気泳動装置にセットし、サンプルを塗布します。

青色は、泳動の進み具合を見るための目印の色素です。

泳動を開始します。

青色の色素とともに上から下に移動していきます。

移動とともに分離が始まります。

真ん中に見えるカラフルなバンドは、分子量マーカーです。

カラフルに色が付けられています。

青色の線は、目印の色素です。

反対側にもポリアクリルアミドゲルがあるので、二重に見えてます。

卵白アルブミンは、無色なので見えません。

泳動終了後、ガラス板からポリアクリルアミドゲルを外します。

分子量マーカーは色がついていますが、卵白アルブミンは色がありませんので染色をします。

カラフルなバンドが分子量マーカーです。

左右対称の真ん中あたりに、うっすらと青色のバンドが見えます。

脱色をするともう少しはっきりバンドが見えるのですが、時間の関係で脱色はしていません。

この結果をもとに卵白アルブミンの分子量を求めます。

２年生のみなさん、他の実習でもＳＤＳ－ＰＡＧＥ法は使用しますので、しっかり頑張っていきましょう。

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みなさん、こんにちは。

今回の２年生の生化学実習では、

タンパク質の定量を行いました。

使用したタンパク質は、

前回分離し透析した卵白アルブミン水溶液です。

久しぶりに使用試薬の調製から行いました。

同時にサンプルの調製も行いました。

最初に、吸収スペクトルの作成を行いました。

タンパク質の極大吸収波長の２８０ｎｍは確認できたかな。

卵白アルブミン水溶液の吸収スペクトルです。

２８０ｎｍ付近に極大吸収がでていますね。

２年生は、手書きの吸収スペクトルを作成中。

さらに、紫外吸収法により

卵白アルブミンの定量（計算法）を行いました。

次に比色分析による定量を行いました。

今回は、タンパク質なので、

ビウレット法によりタンパク質の定量（検量線法）を行いました。

タンパク質標準液のビウレット反応です。

濃度により色の濃さが変わります。

サンプルのビウレット反応です。

サンプルも濃度を変えて測定をします。

測定終了後、

お互いの測定データについて意見交換かな。

今年の２年生は、班だけではなく、

みんなで取り組むことが多いです。

共通認識がもてるので、いい傾向だと思います。

十分な結果が得られ、

卵白アルブミンの定量ができました。

２年生のみなさん、

この調子で頑張っていきましょう。

タンパク質の実習は、あと２回続きます。

しっかり取り組んでいきましょう。

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みなさん、こんにちは。

愛玩動物看護学科2年生が、

動物愛護・適正飼養実習Ⅱで

ウサギの爪切りを行いました。

今回はタオルを使用して、

ウサギを保定しました。

ウサギはこのような

仰向けの姿勢になると落ち着きます。

タオルの隙間から、

一肢ずつ出して爪切りを行います。

このときにタオル保定がきつくなり過ぎないよう、

緩み過ぎないように気を付けます。

2年生が丁寧に爪切りをしてくれたおかげで、

ウサギは大人しくしてくれました。

動物病院には、

様々な動物種が来院します。

動物の特性をよく理解して、

看護を行いましょう♪

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みなさん、こんにちは。

愛玩動物看護学科2年生が、

動物愛護・適正飼養実習Ⅱで

ウサギの保定について学びました。

｢保定｣とは、

診察の際に動物を支えることをいいます。

保定をすることで、

スムーズに検査・処置を行うことができ、

動物と周囲の人間がケガをすることを防ぎます。

今回、タオルを使用してウサギを保定しました。

ウサギは、

イヌ・ネコに比べて、

後ろ足が骨折しやすいです。

柔らかいタオル等で

身体を保護・固定することで、

安全な保定がしやすくなります。

また、

高いテーブルの上からの

落下による事故を防ぐため、

なるべく低い位置で診察を行います。

動物病院には、

様々な動物が患者さんとして来院します。

動物の特性をよく理解して、

ストレスの少ない診察を心がけましょう(#^^#)

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みなさん、こんにちは。

今回の２年生の生化学実習では、

卵白アルブミンの分離を行いました。

この実習の最初にDNAの分離を行いましたが、

今回はタンパク質の分離です。

それでは、実習の様子をご覧ください。

まずは、卵を卵白と卵黄に分けます。

慎重に慎重に・・・。

次に㏗指示薬を滴加します。

卵白の色が変わります。

次に酢酸を滴加します。

酢酸は酸なので、タンパク質の変性が起こります。

遠心をします。

上清に硫安を加えます。

（塩析です。）

初めての塩析、ちょっと驚きもあったようです。

遠心をします。

再度、硫安により塩析を行います。

沈殿（アルブミン）が生じてきます。

これを遠心し、

沈殿を蒸留水で溶かし、

透析を行います。

初めての透析です。

慣れない操作なので、協力して行います。

透析（脱塩）中です。

次回の実習では、

この卵白アルブミンを使用して、

タンパク質の定量を行います。

２年生のみなさん、

卵白アルブミンの分離はいかかがでしたか。

タンパク質の性質を利用した分離方法なので、

タンパク質の性質の再確認ができたと思います。

次回も頑張っていきましょう。

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みなさん、こんにちは。

今日（６月２８日）は、

『動物看護の日』です。

愛玩動物看護師法が公布された日にちなんで、

制定されました。

６月３０日（日）には、

動物看護職協会が主催する

「動物看護の日」イベントが、

日本歯科大学生命歯学部 九段ホールにて、

１４：００～１７：００に開催される予定です。

興味のある学生・卒業生は、

参加してみるはいかがでしょうか？

さて、

６月４日（火）から４日間の日程で、

第１期定期試験が行われました。

１年生にとっては、

この学校に入って初めての定期試験。

試験にも早く慣れ、

学校生活のリズムを軌道にのせていきたいですね。

２年生にとっては、

慣れているとはいえ、

進級して初めの試験になります。

今年度の後半には、

就職や国家試験を意識しなければならない、

大切な時期に入っていきます。

基礎をしっかりと身につけていくことが重要ですので、

日々の勉強を大切にしていきましょう。

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