1年生の遺伝子操作学実習では最後に実技試験があります。
午前チームは3時間以内に全員終了しました。
午後チームはどうなるでしょうか。
解答用紙へ実際に行った操作を記録していきます。
作業の途中に電気泳動用bufferを希釈します。
メスアップの時はメニスカスをしっかりと合わせましょう。
アガロースゲルは電子レンジで溶解します。
作業は慎重に。。。
午後チームも大幅に時間を過ぎることもなくできました。
実技試験では、1年間に学んだことがどれくらい身に付いているのかを、お互いに確認するために行っています。
2年生に向けて、出来なかったところなどは復習しておくといいと思います。
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みなさん、こんにちは。
２月１４日の今日はバレンタインデーですが、バイオ通信も３０００回の節目を迎えました。
これもご覧いただいているみなさまのおかげです。
これからも、バイオ通信をよろしくお願いします。
１年生の遺伝子操作学実習では最後に実技試験を行っています。
内容はプラスミドの調製とアガロースゲル電気泳動です。
試験時間は３時間、午前チーム、午後チームに分かれての実施です。
プラスミドの調製はボイル法かアルカリSDS法を選択して調製します。
煮沸の後に、沈殿物(宿主菌の染色体DNAと変性した菌体のタンパク質)を取り除きます。
プラスミドが調製出来たら、アガロースゲル電気泳動を行います。
泳動後は染色して、プラスミドを確認します。
実技試験では、全ての試薬、器具は自分で準備して作業します。
後片付けも含めて３時間となります。
時間が限られていますので、操作の順番も考えて動かないといけません。
午前チームはまず、アガロースゲルの調製から行っていました。
午後はどうなるでしょうか。
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1年生の遺伝子操作学実習で、ボイル法で調製したプラスミドを精製しました。
フェノール抽出により、プラスミド溶液に含まれている、タンパク質を除去(除タンパク)します。
等量の平衡化中性フェノールをプラスミド溶液へ加えて、攪拌します。
フェノールを加えて混ぜると、乳化しました。
遠心後、3層に分かれます。
上層にプラスミド、中間層に変性したタンパク質、下層にフェノールです。
平衡化中性フェノールには酸化防止剤である、8-ヒドロキシキノリンが入っています。
黄色なので上清と区別しやすくなっています。
しっかりと確認してから。。。
上層の溶液を新しいマイクロチューブへ移します。
中間層、下層を取らないように気を付けて。
移した溶液と等量のフェノール：クロロホルム(1：1)を加え、混和、遠心。
上清を取り、等量のクロロホルムを加えて、混和、遠心。
上清をアルコール沈殿すると、精製したプラスミドが得られます。
左から右へ泳動したサンプル量が多くなっています。
タンパク質が取り除かれキレイになりました。
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1年生の遺伝子操作学実習でプラスミドの調製を行いました。
今回はアルカリSDS法で抽出します。
プラスミド保有菌をマイクロチューブへ取り、遠心して菌体を集めます。
アルカリSDS法は、
SolutionI、SolutionⅡ、SolutionⅢと順番に入れていきます。
SolutionⅡは溶菌。
SDSにより菌体の細胞膜構造を破壊し、NaOHにより染色体DMAを変性させます。
SolutionⅢは中和。
酢酸カリウムで溶液のpHを中性に戻します。
攪拌すると乳白色のおからのような沈殿が見られます。
遠心します。
沈殿と浮遊している、おからを吸わないように注意しながら、
上清を新しいマイクロチューブへ取ります。
アルコール沈殿を行いプラスミドをペレットにします。
真空デシケーターで乾燥させます。
TEにペレットを溶解したら、プラスミド溶液の出来上がりです。
アルカリSDS法では主に、閉環状DNAが調製できます。
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1年生の遺伝子操作学実習でプラスミドの調製を行いました。
今回はボイル法です。
全培養したプラスミド保有菌をマイクロチューブへ取ります。
遠心して菌体を集めます。
STET、リゾチームを入れて菌体を再浮遊します。
リゾチームは菌体の細胞壁を破壊します。
沸騰水浴中で煮沸(ボイル)します。
遠心すると、菌体の染色体DNAと変性タンパク質が沈殿します。
プラスミドは溶液中の存在します。
沈殿は必要ないので取り除きます。
アルコール沈殿を行うと、核酸は水に溶解していられなくなり、
凝集して沈殿となります。
遠心してプラスミドを回収します。
TEに溶解して、プラスミド溶液の出来上がりです。
ちゃんと調製できたかをアガロースゲル電気泳動で確認します。
矢印の位置で光っているのがプラスミド(DNA)です。
左のレーンはRNAを除去したプラスミド溶液。
右のレーンはRNAを除去していない溶液です。
プラス側に長く伸びて見えるのがRNAです。
バンドが確認できたのでプラスミドが調製出来たようです。
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臨床検査技術学科２年生の遺伝子･染色体検査学演習で、
１日目はPCRでDNA断片を増幅しました。
２日目は増幅したDNA断片のアガロースゲル電気泳動を行います。
アガロースゲルのサンプル溝へサンプルを
アプライするのは初めてなので、練習してから行いました。
take先生がポイント解説してくれました。
視線が熱くて余計に緊張する？
その調子！
班員も見守ります。
マイクロチューブからサンプルを取り
静かにアガロースゲルへアプライします。
手は固定してぶれないようにします。
100Vで30分程泳動後、染色してからDNAのバンドを確認します。
Aクラスも上手くDNAが増幅できていたようです。
細かい作業ですけれど慣れてくださいね。
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臨床検査技術学科２年生の遺伝子･染色体検査学演習で
１日目にはPCRを行いました。
２日目はアガロースゲル電気泳動により、増幅したDNA断片を分離し確認します。
サンプルのアプライを余りのアガロースゲルを使って練習します。
手がぶれないように固定するとやり易いです。
班員に見守られながら。。。
慎重に。。。
Aクラスの皆さんの真剣な様子です。
泳動後はアガロースゲルを染色します。
染色後、UVトランスイルミネーター上で観察します。
今回は３種類の大きさのDNA断片を増幅しました。
バンドがしっかりと確認できています。
成功ですね。
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皆さん、こんにちは☺
愛玩動物看護学科１年生の、微生物学実習の様子をお伝えします。
この実習では、実際に微生物を取り扱いながら、
細菌や菌類、ウイルス、
また、寒天粉末培地の作製方法や、
器具の使用方法などの知識も身に付けます。
今回は、
グラム染色は、細菌を「赤色」と「青色」
染色した細菌を顕微鏡を使って、色、形などを観察し、
どういった細菌なのかを確認します。
まずは、デモンストレーションを見て、しっかりメモを取ります。
染色時間も大切です。
班ごとに時間を確認しながら染色を行なっています。
染色した細菌を顕微鏡使用して観察しています。
うまく染色できたでしょうか。
大学病院や大きな動物病院では、
遺伝子検査や細菌検査を行うことがあります。
将来そういった病院でも、
「活躍できる愛玩動物看護師」になるため、
しっかりと学びましょう。
実習を通して、様々な知識を身に付けて欲しいと思います♬
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学科ブログ管理者のせいで、
だいぶ前に作成していたのに、
お蔵入りになってしまっていました。
すみません。
沖縄の浦添看護学校で開催された、
合同オープンキャンパスへ参加してきました。
オープンキャンパス前日は豪雨で大変でしたが、
当日は雨も降らず、
たくさん参加者の方がお見えになりました。(全体では約200名程)
応用生物科学科は、
「核の中のスゴイやつ！DNAを見てみよう」を行いました。
バナナをつぶして、バナナのDNAを抽出します。
アルコール沈殿するとDNAが出現し、
皆さんびっくりΣ(ﾟДﾟ)されていました。
今回の参加者の方は、
とても熱心な方が多かったです。
沖縄の方にとって神奈川の気候は少し寒いけれど、
バイオに興味が出たらいいなぁと思いました。
当日は浦添看護の学生さんと、
沖縄在住の卒業生にお手伝いいただき、
とても助かりました。
ありがとうございました。
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湘央学園,バイオテクノロジー,専門学校,バイオ通信,バイオ,実習
みなさん、こんにちは。
１年生の植物バイオの授業で、課題発表を行いました。
以下の６つのテーマについてをパワーポイントにまとめ、発表をしてもらうというものです。
１．茎頂培養
※写真撮影を忘れてしまいました。
すみません。
２．ウイルス検定
３．葯培養
４．胚培養
５．細胞融合
６．植物遺伝子組換え
パワーポイントの使用もはじめてという人もいましたが、それぞれユニークなところもあったり、みなさん、うまく発表できていたと思います。
よかったです。
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