みなさん、こんにちは。
前回はブロッコリからのＤＮＡ抽出の実習風景をお届けしました。
最初が植物からのＤＮＡ抽出を経験したので、今度は動物由来のＤＮＡ抽出を経験します。
具体的にはサケの白子からＤＮＡを抽出します。
さて、動物由来のＤＮＡはどのように観察されるでしょうか？
まずは、冷凍してあったサケの白子をはさみで細かくします。
ＤＮＡ抽出のための試薬を加え、スターラーで撹拌します。
一定時間撹拌した溶液の一部を、駒込ピペットで試薬ビンに分取します。
タンパク変性液を加えて、激しく撹拌します。
撹拌・・・撹拌・・・
撹拌後は、試薬ビンの溶液を遠心管２本にわけ、バランサーでバランスをとり、遠心分離機にかけます。
遠心後は、このようになりました。
上から水層(白く濁っている層です)、変性タンパク層(白く濁っている層と無色透明な層の間です)、
タンパク変性液の層(無色透明な層)です。
※今回はタンパク変性液を加えて、撹拌、遠心、水層を分取する操作を１回しか行いませんでしたが、
これを複数回繰り返すときれいなＤＮＡをとることができます。
一番上の水層を駒込ピペットでビーカーに移します。
そこにエタノールを加えると・・・
上の無色透明なエタノール層に水層からＤＮＡが析出してきました。
析出してきたサケの白子のＤＮＡとブロッコリのＤＮＡを比較してみると、どうでしょうか？
写真ではありますが、みなさんはどう感じられますか？
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