みなさん、こんにちは。
今回のバイオコース２年生の生化学実習は、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法です。
タンパク質を電気泳動して、分子量の測定を行いました。
今回用いたタンパク質は、唾液アミラーゼです。
なぜに唾液アミラーゼ？次回の実習でも、唾液アミラーゼの分子量を測定します。
では、最初にポリアクリルアミドゲルの作製からです。
分離ゲルから調製します。
分離ゲルがゲル化したら、濃縮ゲルの作製です。ゲルの下方にゲルが固まっている線が見えます。
サンプルコームを差し込んだ状態です。
そして泳動槽にセットします。そして、サンプルを塗布して、泳動開始です。
写真では、あまりよく見えないですが、青色の線が見えると思います。
２枚セットなので、後ろ側にもう一枚の泳動のバンドも見えます。
分子量マーカーは、着色済みなので、分離の様子がわかります。
泳動終了後、タンパク染色を行います。
クマシーブリリアントブルーで染色をしました。
時間の関係で脱色はしていないのですが、タンパク質のバンドはしっかりと見えます。
各バンドから、今回の目的である唾液アミラーゼの分子量を推定しました。
今回は、操作もそれほどなく、待ち時間もあったので、実習中の様子は和やかでした。
測定データをまとめ中です。
２年生のみなさん、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法は、他の実習でも行いますので、しっかり覚えておきましょう。
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