2年生の免疫化学実習では、モノクローナル抗体を作製するために、細胞融合を行いました。
手順は
①マウスに抗原を腹腔内投与して抗体を作らせます。
②骨髄腫細胞であるミエローマ細胞を培養します。このミエローマ細胞はHAT選択培地に感受性なHGPRT欠損株を使用します。
マウスから脾臓を取り出し、すりつぶして細胞を集めます。最初は赤血球も混じっているので沈殿は赤みがかっています。
0.83%塩化アンモニウムを加えて赤血球を溶血させると、沈殿(細胞)は白くなります。。
培地に細胞を浮遊させて、一部をとり、細胞数をカウントします。
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