みなさん、こんにちは。
１年生の化学実習では、
モル吸光係数を求める実習を行いました。
３期に入り、いろいろな実習を行っていますが、
化学実習では、まだまだ基本技術の確認・確認・再確認です。
まずは、いつも通りの準備からです。
連携を取りながら進めているようです。
希釈系列を各自作製し、吸光度測定をします。
測定後、グラフを作成し、
結果をまとめていきます。
久しぶりのメスピペットの操作で、
少し操作が怪しい部分もありましたが、
全員、ランベルト－ベールの法則が確認でき、
モル吸光係数を求めることができました。
１年生のみなさん、
これからもしっかり取り組んで、
しっかり考えて、
技術を磨いていきましょう。
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みなさん、こんにちは。
今回の１年生の化学実習は、吸収スペクトルの作成をしました。
吸収スペクトルは、物質がどの波長の光をどの程度吸収するかをグラフに表したものです。
吸収スペクトルの作成は、バイオサイエンス実習でも行いましたので、今回も復習を兼ねて実習を行いました。
今回使用した溶液です。バイオサイエンス実習では２種類でしたが、今回は３種類の色溶液を用意しました。
復習を兼ねてなので、代表者３名に測定をお願いしました。
３種類の溶液の吸収スペクトルです。
上から順番に青色溶液（６００ｎｍ付近）、黄色溶液（４００ｎｍ付近）、赤色溶液（５００ｎｍ付近）に最も光の吸収があるようです。
青色溶液
黄色溶液
赤色溶液
１年生のみなさんは、しっかり確認するために、吸収スペクトルを手書きで作成していきます。
測定値が多いので、書き間違えないように、集中してプロットしていきます。
これで、色と光の波長の関係が再確認できたと思います。
１年生のみなさん、次回も頑張っていきましょう。
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みなさん、こんにちは。
夏休みが終わり、３期の授業が始まっています。
１年生の化学実習も始まりました。
今回は、夏休み期間中に忘れていないかの確認を含めて、
久しぶりの試薬調製を行いました。
各自分担して、調製を行いましたのでその様子を少しご紹介です。
まずは、ガラス器具類の片付けからです。
しっかり場所の再確認はできてるかな？
続いて試薬調製です。
お互いに確認しながら取り組んでいるようです。
3期の授業が始まって少し経っていますので、少し余裕があるようです。
少し調製方法を勘違いしたところもありましたが、
今後使用する試薬の調製ができました。
あとは、実習で使用してみて、
正確に調製できたかの確認になります。
化学実習以外の実習も始まっていますが、
いよいよ化学実習も始まります。
１年生のみなさん、頑張っていきましょう。
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2年生の免疫化学実習では、
モノクローナル抗体の作製を行っています。
前回、PEGで細胞融合を行った細胞は、HAT培地で培養中です。
今回はHT培地へ培地交換を行います。
培地を半分アスピレーターで吸って減らします。
新しい培地を2滴5mLピペットで2滴加えます。
96ウエルプレートに触れないように、
滴下していきます。
かなり集中して滴下するので眼が疲れます…。
ハイブリドーマが元気に育つといいですね。
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みなさん、こんにちは。
２年生の生化学実習の最後は、
実技試験です。
試験の内容は、秘密です。
実技試験の様子をご覧ください。
最初のグループです。
まずは、各自実技試験の準備をしていきます。
次に実技試験の手順を考えていきます。
悩んでいるようです。
手順に沿って実験を行っていきます。
この実技試験では、
与えられた課題について自分で考え、
実験をしていきます。
実験の測定結果から、結果を導いていきます。
次のグループも登場です。
第２グループは、手順から考え始めたようです。
第１グループは終了時間になり、片付けを始めました。
第２グループは準備に取り掛かっているようです。
第２グループも実験に取り掛かったようです。
悩んでいる学生もいるようですが・・・。
実験が終わり、まとめに入っているようです。
順調に進んでいるようですが、結果はどうでしょうか・・・。
そして、いよいよ終了時間が近づいてきました。
片付けを始めた学生もいます。
最後の最後まで、頑張っています。
何か引っかかることがあったのでしょうか・・・。
２年生のみなさん、今回の実技試験はいかかでしたか。
試験時間は、ちょっと長い時間でしたが、十分にできましたか。
これからもしっかり実習は、取り組んでいきましょう。
お疲れさまでした。
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みなさん、こんにちは。
２年生の生化学実習も最後の実技試験を残して、
今回が最後の実習です。
今回の実習は、糖の定性試験を行いました。
まずは、使用する試薬の調製からです。
協力して調製していきます。
試薬調製後、いよいよ定性試験です。
今回使用する糖は、
キシロース、グルコース、フルクトース、
マルトース、ショ糖、デンプン、
そして対象として、
水の７種類について定性試験を行いました。
番号順が逆ですが、すみません。
７本の試験管にいずれかの糖が入っています。
定性試験により同定していきます。
それでは、定性試験の結果を見ていきましょう。
アントロン試験（糖であれば陽性）の結果です。
糖であれば青緑色になります。
水は糖ではありませんので反応しません。
No.１は反応してないようです。
ベネディクト試験（還元糖であれば陽性）の結果です。
還元糖は赤色沈殿ができます。
No.２、３、４、５に赤色沈殿があるようです。
バールフェズ試験（単糖類であれば陽性）の結果です。
単糖類であれば赤色沈殿ができます。
No.２、３、４に赤色沈殿があるようです。
No.７は白く濁っています。
セリワノフ試験（ケトースであれば陽性）の結果です。
ケトース（ケト基をもつ単糖類）であれが紅色になります。
No.３、６が紅色になったようです。
ビアル試験（ペントースであれば陽性）の結果です。
ペントース（五炭糖）であれば青緑色になります。
No.４が青緑色になったようです。
最後にヨウ素反応（デンプンであれば陽性）の結果です。
デンプンであれば青紫色になります。
No.７が青紫色になったようです。
以上、６種類の定性試験を行い、
試験管７本の同定を行いました。
写真では少しわかりずらいので、
一覧表にしてみました。
一覧表をもとに、
みなさんも同定をしてみてください。
今回使用した糖類です。
単糖類（キシロース、グルコース、フルクトース）、
二糖類（マルトース、ショ糖）、
多糖類（デンプン）、
水
補足：還元性有（単糖類とマルトース）、
ケトース（フルクトース）、
ペントース（キシロース）
みなさん、いかかですか。
７本の試験管を同定できましたか。
それでは答え合わせです。
No.１（水）、
No.２（グルコース）、
No.３（フルクトース）、
No.４（キシロース）、
No.５（マルトース）、
No.６（ショ糖）、
No.７（デンプン）となります。
ショ糖は、フルクトース（ケトース）を含んでいますので、
セリワノフ反応で擬陽性を示します。
２年生のみなさん、次回は実技試験です。
頑張っていきましょう。
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みなさん、こんにちは。
２年生の生化学実習では、
ゲルろ過クロマトグラフィーを行いました。
ゲルろ過クロマトグラフィーは、
カラムクロマトグラフィーに分類されます。
ゲルを詰めたカラムで分離された物質を分取し、
分析を行います。
ゲルろ過クロマトグラフィーは、
分子量の違いによって分離されます。
したがって前回のＳＤＳ－ＰＡＧＥ法と同様に、
物質の分子量を求めることができます。
今回は、アミラーゼ（タンパク質、酵素）の
分子量を求めました。
実習は、カラムにゲルを詰める作業からスタートです。
詰め過ぎも詰め足らずもダメなので慎重に詰めていきます。
次にサンプルを塗布します。
ゲルを乱さないように驚異の集中力発揮中、
慎重に慎重に！！！！！
溶出液（緩衝液）を追加しながら、
分離された物質を分取します。
色付きは分子量マーカーです。
早速、分離が始まりました。
下から青色、赤色、黄色が確認できます。
黄色がすべて溶出されたら終了です。
今回は、１ｍＬずつ分取しました。
分取後、
吸光度測定と今回は試料にアミラーゼを用いましたので、
ヨウ素デンプン反応を行いました。
分取した溶液は、青色、赤色、黄色の溶液になっています。
これらの溶液の吸光度を測定します。
ヨウ素デンプン反応でアミラーゼの確認をします。
デンプン溶液にヨウ素を加えると青紫色になります。
アミラーゼは、デンプンを分解しますので、
アミラーゼが分取された試験管は、青紫色になりません。
試験管立ての中央あたりは色がありません。
この部分にアミラーゼが含まれます。
吸光度測定とヨウ素デンプン反応の結果から、
アミラーゼの分子量を求めます。
分取した試験管の本数が多く、
吸光度測定も大変でしたが、
グラフの作成も大変そうでした。
青紫色にならない試験管がある程度の範囲でありましたが、
ヨウ素デンプン反応も確認ができました。
ちょっと長めの実習になりましたが、
アミラーゼの分子量も求められました。
２年生のみなさん、ゲルを詰める作業からの実習、
お疲れ様でした。
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みなさん、こんにちは。
２年生の生化学実習では、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法を用いて、卵白アルブミンの分子量測定を行いました。
※ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法：ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動法
今回使用した卵白アルブミンは、生化学実習で分離した卵白アルブミンです。
まずは、ポリアクリルアミドゲルの作成です。
ポリアクリルアミドゲルを電気泳動装置にセットし、サンプルを塗布します。
青色は、泳動の進み具合を見るための目印の色素です。
泳動を開始します。
青色の色素とともに上から下に移動していきます。
移動とともに分離が始まります。
真ん中に見えるカラフルなバンドは、分子量マーカーです。
カラフルに色が付けられています。
青色の線は、目印の色素です。
反対側にもポリアクリルアミドゲルがあるので、二重に見えてます。
卵白アルブミンは、無色なので見えません。
泳動終了後、ガラス板からポリアクリルアミドゲルを外します。
分子量マーカーは色がついていますが、卵白アルブミンは色がありませんので染色をします。
カラフルなバンドが分子量マーカーです。
左右対称の真ん中あたりに、うっすらと青色のバンドが見えます。
脱色をするともう少しはっきりバンドが見えるのですが、時間の関係で脱色はしていません。
この結果をもとに卵白アルブミンの分子量を求めます。
２年生のみなさん、他の実習でもＳＤＳ－ＰＡＧＥ法は使用しますので、しっかり頑張っていきましょう。
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みなさん、こんにちは。
今回の２年生の生化学実習では、
卵白アルブミンの分離を行いました。
この実習の最初にDNAの分離を行いましたが、
今回はタンパク質の分離です。
それでは、実習の様子をご覧ください。
まずは、卵を卵白と卵黄に分けます。
慎重に慎重に・・・。
次に㏗指示薬を滴加します。
卵白の色が変わります。
次に酢酸を滴加します。
酢酸は酸なので、タンパク質の変性が起こります。
遠心をします。
上清に硫安を加えます。
（塩析です。）
初めての塩析、ちょっと驚きもあったようです。
遠心をします。
再度、硫安により塩析を行います。
沈殿（アルブミン）が生じてきます。
これを遠心し、
沈殿を蒸留水で溶かし、
透析を行います。
初めての透析です。
慣れない操作なので、協力して行います。
透析（脱塩）中です。
次回の実習では、
この卵白アルブミンを使用して、
タンパク質の定量を行います。
２年生のみなさん、
卵白アルブミンの分離はいかかがでしたか。
タンパク質の性質を利用した分離方法なので、
タンパク質の性質の再確認ができたと思います。
次回も頑張っていきましょう。
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みなさん、こんにちは。
１期の定期試験が終わり、
２期の生化学実習の授業が始まりました。
２期最初の実習は、
分析データの解析を中心に行いました。
分析機器を使っての実習なので、
２年生はほとんど手を動かすこともなく、
測定結果をもとに、
考察をしていただきました。
今回は班ごとではなく、
２グループに分かれて考察をしました。
グループでしっかり意見がでているかな？
生化学実習では、
１期のほとんどの項目で試験管を使用してきました。
ですが、今回の実習では、
試験管をほとんど使用することもなく、
２年生は少し拍子抜けしたような感じでした。
次回からの実習では、
しっかり試験管も使用していきますので、
頑張っていきますよ。
ところで、分析結果の考察は、
グループごとにどうな感じにまとまったのでしょう。
１期に実習結果の考察を班ごとに考えてきたので、
少し成果があったようです。
いろいろなことに気づいて、
それぞれ考察ができているように思いました。
２年生のみなさん、頑張っていきましょう。
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