2年生の免疫化学実習では、

モノクローナル抗体の作製を行っています。

前回、PEGで細胞融合を行った細胞は、HAT培地で培養中です。

今回はHT培地へ培地交換を行います。

培地を半分アスピレーターで吸って減らします。

新しい培地を2滴5mLピペットで2滴加えます。

96ウエルプレートに触れないように、

滴下していきます。

かなり集中して滴下するので眼が疲れます…。

ハイブリドーマが元気に育つといいですね。

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みなさん、こんにちは。

２年生の生化学実習の最後は、

実技試験です。

試験の内容は、秘密です。

実技試験の様子をご覧ください。

最初のグループです。

まずは、各自実技試験の準備をしていきます。

次に実技試験の手順を考えていきます。

悩んでいるようです。

手順に沿って実験を行っていきます。

この実技試験では、

与えられた課題について自分で考え、

実験をしていきます。

実験の測定結果から、結果を導いていきます。

次のグループも登場です。

第２グループは、手順から考え始めたようです。

第１グループは終了時間になり、片付けを始めました。

第２グループは準備に取り掛かっているようです。

第２グループも実験に取り掛かったようです。

悩んでいる学生もいるようですが・・・。

実験が終わり、まとめに入っているようです。

順調に進んでいるようですが、結果はどうでしょうか・・・。

そして、いよいよ終了時間が近づいてきました。

片付けを始めた学生もいます。

最後の最後まで、頑張っています。

何か引っかかることがあったのでしょうか・・・。

２年生のみなさん、今回の実技試験はいかかでしたか。

試験時間は、ちょっと長い時間でしたが、十分にできましたか。

これからもしっかり実習は、取り組んでいきましょう。

お疲れさまでした。

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みなさん、こんにちは。

２年生の生化学実習も最後の実技試験を残して、

今回が最後の実習です。

今回の実習は、糖の定性試験を行いました。

まずは、使用する試薬の調製からです。

協力して調製していきます。

試薬調製後、いよいよ定性試験です。

今回使用する糖は、

キシロース、グルコース、フルクトース、

マルトース、ショ糖、デンプン、

そして対象として、

水の７種類について定性試験を行いました。

番号順が逆ですが、すみません。

７本の試験管にいずれかの糖が入っています。

定性試験により同定していきます。

それでは、定性試験の結果を見ていきましょう。

アントロン試験（糖であれば陽性）の結果です。

糖であれば青緑色になります。

水は糖ではありませんので反応しません。

No.１は反応してないようです。

ベネディクト試験（還元糖であれば陽性）の結果です。

還元糖は赤色沈殿ができます。

No.２、３、４、５に赤色沈殿があるようです。

バールフェズ試験（単糖類であれば陽性）の結果です。

単糖類であれば赤色沈殿ができます。

No.２、３、４に赤色沈殿があるようです。

No.７は白く濁っています。

セリワノフ試験（ケトースであれば陽性）の結果です。

ケトース（ケト基をもつ単糖類）であれが紅色になります。

No.３、６が紅色になったようです。

ビアル試験（ペントースであれば陽性）の結果です。

ペントース（五炭糖）であれば青緑色になります。

No.４が青緑色になったようです。

最後にヨウ素反応（デンプンであれば陽性）の結果です。

デンプンであれば青紫色になります。

No.７が青紫色になったようです。

以上、６種類の定性試験を行い、

試験管７本の同定を行いました。

写真では少しわかりずらいので、

一覧表にしてみました。

一覧表をもとに、

みなさんも同定をしてみてください。

今回使用した糖類です。

単糖類（キシロース、グルコース、フルクトース）、

二糖類（マルトース、ショ糖）、

多糖類（デンプン）、

水

補足：還元性有（単糖類とマルトース）、

ケトース（フルクトース）、

ペントース（キシロース）

みなさん、いかかですか。

７本の試験管を同定できましたか。

それでは答え合わせです。

No.１（水）、

No.２（グルコース）、

No.３（フルクトース）、

No.４（キシロース）、

No.５（マルトース）、

No.６（ショ糖）、

No.７（デンプン）となります。

ショ糖は、フルクトース（ケトース）を含んでいますので、

セリワノフ反応で擬陽性を示します。

２年生のみなさん、次回は実技試験です。

頑張っていきましょう。

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みなさん、こんにちは。

２年生の生化学実習では、

ゲルろ過クロマトグラフィーを行いました。

ゲルろ過クロマトグラフィーは、

カラムクロマトグラフィーに分類されます。

ゲルを詰めたカラムで分離された物質を分取し、

分析を行います。

ゲルろ過クロマトグラフィーは、

分子量の違いによって分離されます。

したがって前回のＳＤＳ－ＰＡＧＥ法と同様に、

物質の分子量を求めることができます。

今回は、アミラーゼ（タンパク質、酵素）の

分子量を求めました。

実習は、カラムにゲルを詰める作業からスタートです。

詰め過ぎも詰め足らずもダメなので慎重に詰めていきます。

次にサンプルを塗布します。

ゲルを乱さないように驚異の集中力発揮中、

慎重に慎重に！！！！！

溶出液（緩衝液）を追加しながら、

分離された物質を分取します。

色付きは分子量マーカーです。

早速、分離が始まりました。

下から青色、赤色、黄色が確認できます。

黄色がすべて溶出されたら終了です。

今回は、１ｍＬずつ分取しました。

分取後、

吸光度測定と今回は試料にアミラーゼを用いましたので、

ヨウ素デンプン反応を行いました。

分取した溶液は、青色、赤色、黄色の溶液になっています。

これらの溶液の吸光度を測定します。

ヨウ素デンプン反応でアミラーゼの確認をします。

デンプン溶液にヨウ素を加えると青紫色になります。

アミラーゼは、デンプンを分解しますので、

アミラーゼが分取された試験管は、青紫色になりません。

試験管立ての中央あたりは色がありません。

この部分にアミラーゼが含まれます。

吸光度測定とヨウ素デンプン反応の結果から、

アミラーゼの分子量を求めます。

分取した試験管の本数が多く、

吸光度測定も大変でしたが、

グラフの作成も大変そうでした。

青紫色にならない試験管がある程度の範囲でありましたが、

ヨウ素デンプン反応も確認ができました。

ちょっと長めの実習になりましたが、

アミラーゼの分子量も求められました。

２年生のみなさん、ゲルを詰める作業からの実習、

お疲れ様でした。

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みなさん、こんにちは。

２年生の生化学実習では、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法を用いて、卵白アルブミンの分子量測定を行いました。

※ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法：ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動法

今回使用した卵白アルブミンは、生化学実習で分離した卵白アルブミンです。

まずは、ポリアクリルアミドゲルの作成です。

ポリアクリルアミドゲルを電気泳動装置にセットし、サンプルを塗布します。

青色は、泳動の進み具合を見るための目印の色素です。

泳動を開始します。

青色の色素とともに上から下に移動していきます。

移動とともに分離が始まります。

真ん中に見えるカラフルなバンドは、分子量マーカーです。

カラフルに色が付けられています。

青色の線は、目印の色素です。

反対側にもポリアクリルアミドゲルがあるので、二重に見えてます。

卵白アルブミンは、無色なので見えません。

泳動終了後、ガラス板からポリアクリルアミドゲルを外します。

分子量マーカーは色がついていますが、卵白アルブミンは色がありませんので染色をします。

カラフルなバンドが分子量マーカーです。

左右対称の真ん中あたりに、うっすらと青色のバンドが見えます。

脱色をするともう少しはっきりバンドが見えるのですが、時間の関係で脱色はしていません。

この結果をもとに卵白アルブミンの分子量を求めます。

２年生のみなさん、他の実習でもＳＤＳ－ＰＡＧＥ法は使用しますので、しっかり頑張っていきましょう。

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みなさん、こんにちは。

今回の２年生の生化学実習では、

卵白アルブミンの分離を行いました。

この実習の最初にDNAの分離を行いましたが、

今回はタンパク質の分離です。

それでは、実習の様子をご覧ください。

まずは、卵を卵白と卵黄に分けます。

慎重に慎重に・・・。

次に㏗指示薬を滴加します。

卵白の色が変わります。

次に酢酸を滴加します。

酢酸は酸なので、タンパク質の変性が起こります。

遠心をします。

上清に硫安を加えます。

（塩析です。）

初めての塩析、ちょっと驚きもあったようです。

遠心をします。

再度、硫安により塩析を行います。

沈殿（アルブミン）が生じてきます。

これを遠心し、

沈殿を蒸留水で溶かし、

透析を行います。

初めての透析です。

慣れない操作なので、協力して行います。

透析（脱塩）中です。

次回の実習では、

この卵白アルブミンを使用して、

タンパク質の定量を行います。

２年生のみなさん、

卵白アルブミンの分離はいかかがでしたか。

タンパク質の性質を利用した分離方法なので、

タンパク質の性質の再確認ができたと思います。

次回も頑張っていきましょう。

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みなさん、こんにちは。

１期の定期試験が終わり、

２期の生化学実習の授業が始まりました。

２期最初の実習は、

分析データの解析を中心に行いました。

分析機器を使っての実習なので、

２年生はほとんど手を動かすこともなく、

測定結果をもとに、

考察をしていただきました。

今回は班ごとではなく、

２グループに分かれて考察をしました。

グループでしっかり意見がでているかな？

生化学実習では、

１期のほとんどの項目で試験管を使用してきました。

ですが、今回の実習では、

試験管をほとんど使用することもなく、

２年生は少し拍子抜けしたような感じでした。

次回からの実習では、

しっかり試験管も使用していきますので、

頑張っていきますよ。

ところで、分析結果の考察は、

グループごとにどうな感じにまとまったのでしょう。

１期に実習結果の考察を班ごとに考えてきたので、

少し成果があったようです。

いろいろなことに気づいて、

それぞれ考察ができているように思いました。

２年生のみなさん、頑張っていきましょう。

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みなさん、こんにちは。

今回の応用生物科学科１年生の化学実習は、

実技試験を行いました。

実技試験の始まる前の実習室です。

項目順に実習台を移動します。

それでは、実技試験の様子をご覧ください。

最初のグループです。

これから行う実習の手順を考えます。

次に実習操作に入ります。

操作後、測定に移ります。

そして最後に、まとめです。

決められた時間に移動しながら、実技試験を行いました。

順調に進んでいけたようです。

次のグループです。

第２グループは、早めに操作が終わったようです。

まとめに入っています。

おやおや・・・。

こちらのグループは立ったまま、まとめに入ってますね。

落ち着いてくださいね。

ちょっとしたミスだったり、

勘違いはありましたが、

全員無事に終了しました。

１年生のみなさん、今回の実技試験を振り返って、

しっかりと復習をしてくださいね。

お疲れさまでした。

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みなさん、こんにちは。

応用生物科学科１年生の化学実習では、

今回、中和滴定を行いました。

今回の実習では、２種類のpH指示薬を使用しました。

こちらは、フェノールフタレインの色の変化です。

酸性側で無色、アルカリ性側で赤色に変化します。

２つ目は、メチルオレンジです。

酸性側で赤色、アルカリ性側で黄色に変化します。

使い慣れないビュレットを慎重に操作しながら、

色の変化に注意して定量を行いました。

そのためか、色々な態勢が・・・・・！

メスピペットは今までも使ってきましたが、

今回のビュレットは、初めて使用しました。

そのためか思ったより時間はかかりましたが、

無事に時間内に定量できました。

１年生のみなさん、色の変化はいかかでしたか。

判断の難しい部分もあったと思います。

１つずつ、しっかりと確認をしていきましょう。

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