微生物学実習で行った鼻腔内ブドウ球菌検出の続きをお届けします。
前回、マンニット食塩培地で自分の鼻腔内ブドウ球菌の検出を行いましたが、今回はコアグラーゼ試験(試験管法)を行い、黄色ブドウ球菌か、表皮ブドウ球菌かを鑑別します。
このバイアルの内容物が、コアグラーゼ試験に使用するウサギプラズマです。
無菌的に採血されたウサギ血液から作られ、凍結乾燥(freeze dry)されたものです。
凍結乾燥品なので、粉末であることが解りますね!
これに滅菌生理食塩水を加え溶解して、使用します。
ウサギプラズマ溶液を滅菌試験管に分取して、そこに被検菌を混合します。それを37℃でインキュベーションします。
すると・・・
被検菌Aを入れた試験管は、試験管を大きく傾けると水と同じように流れますが・・・
被検菌Bを入れた試験管は、ゼリーのように動きません。
コアグラーゼは黄色ブドウ球菌によって産生される特有の酵素です。表皮ブドウ球菌は、これを産生しません。つまり、被検菌Bが黄色ブドウ球菌であることがわかります。
コアグラーゼには、菌が増殖する過程で菌体外に分泌される遊離コアグラーゼと菌体成分の一部として細胞の表層部に存在し、菌体外には分泌されない結合コアグラーゼの2種類があります。今回の試験管法では、遊離コアグラーゼが試験の対象となります。
では、なぜウサギプラズマが凝固するのでしょうか?そのメカニズムは、今のところ、はっきりわかっていません。
しかし、黄色ブドウ球菌が産生したプロスタヒロコアグラーゼが、プラズマ中のある因子によって活性スタヒロコアグラーゼとなり、これがフィブリノーゲンをフィブリンに変化させ、凝固が起こると考えられています。