みなさん、こんにちは。
微生物学実習で、植菌した培地の培養後をご覧ください。
まずは、斜面培地の培養後です。
斜面培地の表面に菌が増殖しているのがわかりますか？
次に液体培地の培養後です。
比較のため、
培養前の液体培地（写真上）と、
培養後の液体培地（写真下）を一緒に撮りました。
液体培地が菌体の増殖により、濁っていますね。
最後に平板培地での分離培養後です。
写真ではよくわかりにくいのですが、
２種の混合菌液から分離培養しているので、
分離がうまくいっていると、
２種の異なるコロニーが見られます。
高層培地で穿刺培養も行いました。
写真がうまく撮れなかったので、写真はありません・・・。
穿刺培養では、菌の運動性やガスの発生などを観察できます。
応用生物科学科、愛玩動物看護学科は、
それぞれ違った立場で微生物と向き合いますが、
二学科とも、目に見えない微生物の取扱い方等もしっかりと身につけてくださいね。
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１年生の微生物学実習で、
分離培養と各試験管培地への植菌法を行いました。
初めての白金耳、白金線を用いた無菌操作です。
白金耳を火炎滅菌します。
内炎、外炎の順に先端を焼いていきます。
平板培地へ菌を少し塗ります。
また、火炎滅菌します。
火炎滅菌後の白金耳で、
培地上の菌を塗り広げて希釈していきます。
繰り返すことで、
バラバラのコロニーが形成されやすくなります。
試験管培地は斜面培地、高層培地、液体培地です。
試験管の中が見やすいように手のひらへのせて作業します。
微生物を取り扱う上で基本となる操作の、
白金耳・白金線の火炎滅菌。
分離培養と植菌法。
何度も繰り返し行い、技術を身に着けます。
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1年生の微生物学実習が始まりました。
今回は、各自で平板培地を調製しました。
シャーレ2枚分を作ります。
普通寒天培地の粉末をはかり、蒸留水を入れます。
培地中には固めるための寒天が入っているので、
電子レンジを使って寒天を溶解します。
突沸しないように注意しながら溶解です。
溶液がブクブクしてきたら、そっと出して攪拌します。
完全溶解したらオートクレーブで滅菌します。
条件は121℃、2気圧、15分間です。
オートクレーブが終わったら、
50℃程度に冷ましてから、シャーレへ分注します。
三角フラスコの口を火炎滅菌します。
シャーレに入れます。
落下細菌を防ぐため、
シャーレのフタは全開にしません。
フラスコの口は斜めに保持します。
静かに入れます。
固まるまであまり動かさないように。
固まったらフタを下にして保存します。
一人ひとりできるように練習していきます。
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2年生の免疫化学実習では、
モノクローナル抗体の作製を行っています。
前回、PEGで細胞融合を行った細胞は、HAT培地で培養中です。
今回はHT培地へ培地交換を行います。
培地を半分アスピレーターで吸って減らします。
新しい培地を2滴5mLピペットで2滴加えます。
96ウエルプレートに触れないように、
滴下していきます。
かなり集中して滴下するので眼が疲れます…。
ハイブリドーマが元気に育つといいですね。
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2年生の細胞工学実習で細胞培養を開始しました。
起こした翌日は培地交換です。
昨日起こした細胞を観察します。
一部に偏って培養されていたり、
多すぎる場合には継代培養になります。
培地をアスピレーターで取り除きます。
細胞面から吸わないようにします。
PBS(－)で2回細胞を洗います。
新しい37℃培地を加えます。
さらに培養を続けます。
次は継代を行います。
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2年生の細胞工学実習で、
培地調製を行いました。
培地調製に必要な器具を準備します。
下のフィルターホルダーへ、
湿潤したメンブレンフィルターをのせます。
はみ出さないように注意します。
上のフィルターホルダーをのせて。
締めます。
二重にしたアルミホイルに包んで。
その他の器具も一緒にオートクレーブ滅菌します。
滅菌後、クリーンベンチ内で培地調製を行います。
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2年生の細胞工学実習で、
培地調製を行いました。
滅菌された器具をクリーンベンチへ入れて、
調製開始です。
細胞を培養するためのDMEM培地です。
滅菌水へ粉末を入れて、溶解させます。
黄色い溶液ですね。
炭酸水素ナトリウムを加えると、
赤く色が変化します。
抗生物質を添加し、
最後に血清(FBS+CS)を加えます。
調製できたら、ろ過滅菌を行います。
まず、シリンジに培地と空気を入れ、
フィルターが使用できるかチェックします。
培地入りのシリンジにフィルターをつけて、
元のビーカーへシリンジ内の培地をろ過します。
溶液が全部ろ過出来て、
空気が通らなかったらOKです。
使用できないフィルターは内筒が軽く押せたり、
フィルターホルダーの横から培地が出てきたりしちゃいます。
フィルターが使用できるのを確認したら、
滅菌済みの瓶へ培地をろ過していきます。
滅菌が終わった培地の一部をディッシュに取り、
インキュベーターへ一晩おいて、
コンタミチェックをします。
培地が出来たら、
いよいよ細胞を起こします(^^♪
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微生物学実習で、微生物培養用の培地作製を行いました。
まず、普通寒天培地粉末の所定量を秤量します。
蒸留水を計量します。
普通寒天培地粉末と蒸留水を混ぜ、
電子レンジで加温して、寒天を溶解します。
加温後は、オートクレーブで滅菌します。
滅菌終了後は適温まで冷まし、
今回は平板培地なので、
滅菌シャーレに分注します。
一番重要なシャーレに分注するところを
写真におさめるのを忘れてしまいました。
すみません。
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みなさん、こんにちは。
応用生物科学科１年生が、
細胞組織学実習でＭＳ培地を作製しました。
ＭＳ培地は植物組織培養で使用される基本培地ですが、
これから何度か、
植物ホルモンをいろいろと添加したものを作製しますので、
基本を習得しておきましょう。
今まで電子天秤やｐＨメータの使用方法を覚えてきましたが、
いよいよ実践でそれを使います。
培地固化剤のジェランガム（ゲランガム）を溶解するために、
電子レンジで加温します。
火傷をしないように注意しながら、容器に分注していきます。
フタをしたら、オートクレーブで滅菌です。
滅菌条件もしっかりと覚えておきましょう。
次回は、今回作製した培地を使って、無菌操作を行います。
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みなさん、こんにちは。
滅菌生理食塩水を染みこませた滅菌綿棒で鼻腔内の細菌を釣菌して、
卵黄加マンニット食塩平板培地に塗抹しました。
ブドウ球菌は鼻腔内に多く存在しますが、７.５％という
高い塩化ナトリウム濃度でも増殖が可能という特徴があります。
培養後の培地は、この写真のようなものが大部分でしたが、
こちらの写真のものも、少数見られました。
こちらはマンニット(マンニトール)分解による培地の
酸性化(培地中のフェノールレッドが黄色に変化)と卵黄反応も見られます。
これらのことについて調べると、かなり深みにはまってしまいますが、
時間があるときにじっくりと調べると面白いかもしれません。
まだはっきりとわかっていない部分もあり、すっきりとはしないかもしれませんが、それも勉強ですね。
このあと、これらの菌はコアグラーゼ試験の判定も行いました。
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