2年生の遺伝子工学実習でコロニーハイブリダイゼーションを行いました。
形質転換菌のシャーレを使います。
 
コロニー内に組換えＤＮＡ分子があるかどうかを調べます。

 
ニトロセルロースメンブレンにコロニーを写し取ります。

 
狙いを定めて空気が入らないように密着させます。

 
1分ほど密着させたら、静かにメンブレンをはがしていきます。

 
変性液につけてＤＮＡを一本鎖にします。

 
中和液、リゾチーム液、プロテアーゼ液と反応させていきます。
自然乾燥後に80℃、2時間加熱することによってＤＮＡをメンブレンフィルターに固定させます。
 
次はメンブレンフィルター上におけるＤＮＡのハイブリダイゼーションを行います。
 
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