2年生の遺伝子工学実習でコロニーハイブリダイゼーションを行いました。
形質転換菌のシャーレを使います。
コロニー内に組換えＤＮＡ分子があるかどうかを調べます。
ニトロセルロースメンブレンにコロニーを写し取ります。
狙いを定めて空気が入らないように密着させます。
1分ほど密着させたら、静かにメンブレンをはがしていきます。
変性液につけてＤＮＡを一本鎖にします。
中和液、リゾチーム液、プロテアーゼ液と反応させていきます。
自然乾燥後に80℃、2時間加熱することによってＤＮＡをメンブレンフィルターに固定させます。
次はメンブレンフィルター上におけるＤＮＡのハイブリダイゼーションを行います。
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