2年生の細胞工学実習で細胞培養を開始しました。
起こした翌日は培地交換です。
昨日起こした細胞を観察します。
一部に偏って培養されていたり、
多すぎる場合には継代培養になります。
培地をアスピレーターで取り除きます。
細胞面から吸わないようにします。
PBS(-)で2回細胞を洗います。
新しい37℃培地を加えます。
さらに培養を続けます。
次は継代を行います。
2年生の細胞工学実習で細胞培養を開始しました。
起こした翌日は培地交換です。
昨日起こした細胞を観察します。
一部に偏って培養されていたり、
多すぎる場合には継代培養になります。
培地をアスピレーターで取り除きます。
細胞面から吸わないようにします。
PBS(-)で2回細胞を洗います。
新しい37℃培地を加えます。
さらに培養を続けます。
次は継代を行います。
2年生の細胞工学実習で保存してあった細胞を起こしました。
細胞を起こした翌日は培地交換を行います。
細胞を観察します。
元気に培養フラスコへ接着しているでしょうか。
フラスコ内の培地を取り除き、PBS(-)を細胞表面へ当たらないように加えて細胞を2回ほど洗います。
新しい培地を入れて、37℃、5%炭酸ガスインキュベーター内で培養します。
培地交換をすることで、起こした時に培養フラスコ底面へ接着しなかった細胞や不純物を取り除いて、細胞の増殖によい環境をつくります。
翌日には培養フラスコの8割conf.になっている予定です。
2年生の免疫化学実習ではモノクローナル抗体の作製を行いました。
マウスに抗原を免疫して、マウスの抗体産生細胞とミエローマ細胞をPEGを用いて細胞融合しました。
その後、HAT培地中で培養して、生き残った細胞が目的のハイブリドーマ(融合細胞)です。
HAT培地で培養していたハイブリドーマの培地交換を行いました。これからは、HT培地で培養を続けます。
まずは、培地をアスピレーターで半分ほど取り除きます。
吸引マスターです。アスピレーター担当。
古い培地を吸引した後は、新しい培地(HT培地)を2滴づつ96ウエルマルチプレートへ入れていきます。
枚数が多いと大変ですね♪
クリーンベンチ内での操作もお手の物(^o^)
ハイブリドーマが元気に育ちますように。