１年生の遺伝子操作学実習でプラスミドの調製を行いました。
今回はキットを使用して調製します。
プラスミド保有菌液をマイクロチューブへ取ります。
マイクロチューブは対象にセットしてくださいね。
遠心して細胞を集めます。
沈殿が菌です。上清の培地をできる限り取り除き試薬を加えます。
溶液がしっかりと混和できたかわかるように色がついています。
青色が消えるまで穏やかに転倒混和します。
遠心して、
宿主菌の変性タンパク質と宿主菌の染色体DNAを沈殿させます。
上清を慎重に取り、カラムへ入れます。
カラム内のメンブレンにDNAが吸着。
メンブレンを洗浄してからDNA溶出液を加えます。
遠心して集まった溶出液がプラスミド溶液です。
アガロースゲル電気泳動を行い、プラスミドの有無を確認します。
あっという間に、プラスミドが得られました。
さすが、キットですね。
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