1年生の検査機器総論でアガロースゲル電気泳動を行いました。
アガロースゲル電気泳動はDNAを分離するときによく使われます。
DNA溶液を5μL、サンプル溝へアプライします。
手がぶれないようにしっかりと固定します。
ひとりづつ、サンプルをいれていきます。
アプライの姿勢は、操作しやすい向きで行います。
みんなに見守られながら操作します。
なかなか、いい姿勢で出来ていますね。
電気泳動後、染色したらUVトランスイルミネーター上でアガロースゲルを観察します。
アガロースゲルを突き破ったり、サンプルが漏れたりしないで上手にアプライ出来ていたようです(^^)/
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こんにちは。
応用生物科学科の２年生の生化学実習 第１回目は、ブタの肝臓からのDNAの抽出でした。
長かった春休みを終えて、今年度初の実習・・・
細かい作業工程や精密機器の操作を復習しながら、班で作業を分担・協力しながら和気あいあいと取り組んでいました。
遠心分離した後、上清をとる作業。
駒込ピペットで注意深く集中して採取。
かっこよく決めてるK君
周りも見守ります。
採取後の上清がこちら・・・
とてもきれいにとれました！
かなり省略しますが、全行程を丁寧に確実に行ってくれたため、全班DNAを採取することができました。
このDNAは、また後日の実習で使います。
生化学実習は細かい作業や繰り返しの作業が多く大変ですが、一緒に頑張っていきましょう。
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臨床検査技術学科2年生の臨床化学実習でＰＣＲ法の実習を行いました。
λファージのＤＮＡを三種類のプライマーを使用してサイズの違うＤＮＡ断片を増幅します。
増幅後、アガロースゲル電気泳動により増幅できているのかを確認します。
サンプルをアガロースゲルへアプライします。手がぶれないようにしっかりと固定して行います。
班員に見守られながら。
初めての作業なので緊張気味です。
サンプルは少量(5μL)なので、確実に取ります。
泳動を開始する前に陽極、陰極の向き、電圧を確認してからスタートします。
増幅出来ました(^o^)
細かい作業でしたがみんな上手でした！
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臨床検査技術学科2年生の臨床化学実習で、ＰＣＲ法の実習を行いました。
午前はＢクラス、午後はＡグラスと3日間集中して行う実習でした。
ＰＣＲ法はポリメラーゼ連鎖反応(Polymerase chain reaction)といいます。
鋳型となるＤＮＡの目的の部分を増幅することができます。二種類のプライマーで目的の部分を挟んで増幅させます。
実習ではλファージのＤＮＡを鋳型として3種類のサイズのＤＮＡ断片を増幅しました。
増幅後はアガロースゲル電気泳動によりＤＮＡ断片の有無をチェックします。
アガロースゲルのサンプル溝へサンプルを入れていきます。
5μＬと少量。ちゃんと入れてね。
上手くいったようです。
手が震えないようにしっかりと固定して行います。
サンプルは静かに入れていきます。
電気泳動中は練習問題を。
3日間の実習、あっという間に実習が終わってしまいました。
理解していただけたでしょうか。
わからなくなったら質問にきてくださいね。
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みなさん、こんにちは。
１期、最後の生化学実習は、DNAの定量を行いました。
今回使用したDNAは、この実習で、最初に行ったブタの肝臓から分離したDNAです。
それでは、早速、実習の様子をご覧ください。
まずは、吸収曲線の作成です。
縦書きと横書きで、見た感じが意外と違いますね。
しっかり、DNAの最大吸収波長260nmを示していました。
今回は、操作がそれほど多くないので、データの整理に没頭中！！！！！
次にDNAの定量方法として、ジフェニルアミン法を使用しました。
きれいな青色に呈色をします。
１期の生化学実習の最後に、きれいな感じで終われてよかったです。
実習結果も、よい結果がでました。
２年生のみなさん、この調子で２期も頑張っていきましょう。
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１年生の検査機器総論で電気泳動を行いました。
今回はミニゲル電気泳動槽を使って、DNAを分離します。
サンプル溝へDNA溶液をアプライします。
手が震えないように固定して。
DNA溶液は充填用bufferと混ぜてあるのでサンプル溝へはゆっくりと沈んでいきます。
マイクロピペットの使い方も慣れてきたようですね。
泳動が終わったらアガロースゲルをエチジウムブロミドで染色。
UVトランスイルミネーター上で観察すると。。。
いろいろなサイズにDNAが分離されました。
（上）サンプル溝側がマイナス極、(下)がプラス極です。
DNAは電気泳動用buffer中でマイナスに荷電しているのでプラス極の方へ移動します。
アガロースゲルは網目構造をしていてDNAの大きさによって移動する距離に違いが出てきます。
写真では上の方(大きいサイズ)から下の方(小さいサイズ)へと大きさ順に分離されます。
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