学科ブログ管理者のせいで、
だいぶ前に作成していたのに、
お蔵入りになってしまっていました。
すみません。
沖縄の浦添看護学校で開催された、
合同オープンキャンパスへ参加してきました。
オープンキャンパス前日は豪雨で大変でしたが、
当日は雨も降らず、
たくさん参加者の方がお見えになりました。(全体では約200名程)
応用生物科学科は、
「核の中のスゴイやつ！DNAを見てみよう」を行いました。
バナナをつぶして、バナナのDNAを抽出します。
アルコール沈殿するとDNAが出現し、
皆さんびっくりΣ(ﾟДﾟ)されていました。
今回の参加者の方は、
とても熱心な方が多かったです。
沖縄の方にとって神奈川の気候は少し寒いけれど、
バイオに興味が出たらいいなぁと思いました。
当日は浦添看護の学生さんと、
沖縄在住の卒業生にお手伝いいただき、
とても助かりました。
ありがとうございました。
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湘央学園,バイオテクノロジー,専門学校,バイオ通信,バイオ,実習
みなさん、こんにちは。
毎日暑い日が続いていますが、
水分補給と休息を十分にとって、
熱中症にはお気をつけください。
応用生物科学科では、
８月１９・２０日の２日間、
高校生を対象とした職業体験プログラムを実施しました。
応用生物科学科は、
実験を中心に体験をしていただきました。
参加していただいた高校生のみなさん、
ありがとうございました＆おつかれさまでした。
体験の様子をダイジェストでご紹介したいと思います。
初日の体験は、
ＤＮＡの抽出と細菌の培養を行いました。
実験に必要なものは試薬ですね。
最初に試薬の調製から始めていただきました。
その後、ＤＮＡを抽出するために、
ブロッコリーをすり鉢ですり潰したり、
サケの白子を細かく刻んだりと・・・・・。
さらに、サケの白子からＤＮＡを抽出するために
調整した試薬を入れて、激しく振ったりと、
意外と体力を使っていただきました。
左が振る前、右が振った後です。
ちょっと初日から体力を使っていただきましたが、
無事にブロッコリー＆サケの白子から
ＤＮＡを抽出することができました。
左がブロッコリー、右がサケの白子です。
初日の最後は、細菌の培養を行いました。
２日目の実験に使用します。
２日目の最初は、昨日培養した細菌の染色からです。
細菌をスライドガラスに固定して染色をしました。
染色後、顕微鏡で観察をしました。
２日目の午後は、
アガロースゲル電気泳動を行いました。
ちょっと細かな操作ですが、
高校生のみなさんは、すんなりできてました。
以上、
２日間の体験実験の様子をダイジェストでご紹介しました。
参加していただいた高校生のみなさん、
体験実験はいかがでしたか。
実験は、うまくいったり失敗したりと、
いろいろなことがありますが、
実験することに少しでも興味を持っていただけたらと思います。
２日間、お疲れさまでした。
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2年生の遺伝子工学実習で、
サザンブロッティングを行いました。
調べたいDNAサンプルを電気泳動で分離します。
泳動後、
染色して泳動像を写真にとっておきます。
アガロースゲル中のDNAを変性、中和している間に
ブロッティング装置を用意します。
20×SSCがしみ込んだろ紙を
ガラス板の上にのせます。
その上にアガロースゲルをのせます。
ゲルの周りをラップで囲みます。
アガロースゲルの上に、
メンブレンフィルターを
気泡が入らないように密着させます。
さらに、
アガロースゲルと同じ大きさのろ紙をのせます。
最後にペーパータオルと、
500ｇ程度の重りをのせて一晩おきます。
アガロースゲル中の一本鎖DNAは、
毛細管現象を利用して
メンブレンフィルターへ転写されます。
次の日。。。
重りとペーパータオルを取り除くと。。。
アガロースゲルは水分が無くなり
うっすーくなっています。
メンブレンフィルターをガラス板へ移動して、
サンプル溝、ゲルの大きさをボールペンで書き入れます。
この時、
なるべくメンブレンフィルターを
乾かさないように注意します。
２×SSCで洗浄後、自然乾燥させ、
80℃でbakingしてDNA断片を
メンブレンフィルターに固定させます。
転写されたDNA断片はこの後、
ハイブリダイゼーションを行っていきます。
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みなさん、こんにちは。
今回の２年生の生化学実習は、
ＤＮＡの性質と定量を行いました。
使用したＤＮＡは、
この実習の最初に行った
ＤＮＡの分離で得たＤＮＡです。
得られたＤＮＡは、
ＤＮＡなのかなど考えながら実習を行いました。
最初に吸収スペクトルの作成を行いました。
ＤＮＡは、
２６０ｎｍ付近に最大吸収波長があります。
得られたＤＮＡは、
２６０ｎｍ付近に最大吸収波長があるので、
ＤＮＡのようです。
結果が得られましたので、
最初のまとめ作業です。
吸収スペクトルのグラフは手書きで書きます。
次にジフェニルアミン法を用いて定量を行いました。
ジフェニルアミンは、
ＤＮＡに含まれるデオキシリボースと特異的に反応します。
溶液の吸光度を測定し、
検量線を作成し、定量を行います。
測定後、結果のまとめになります。
今回は項目が少し多かったので、
ちょっと大変だったかも・・・
２年生のみなさん、項目が多いときは、
一つずつ整理をして、
しっかりまとめていきましょう。
お疲れ様でした。
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2年生の遺伝子工学実習で
「ゲルからのDNA断片の回収」を行いました。
アガロースゲル電気泳動を行います。
サンプルは
制限酵素で切断した
プラスミドDNAです。
サンプルのアプライは慎重に。
手がぶれないように固定します。
電気泳動後に目的のバンドを
ゲルバンドカッターで切り取ります。
本番前に練習してから。
アガロースゲルを染色後、
トランスイルミネーター上にのせます。
紫外線を当てながら
目的のバンドを切り取ります。
切り取ったゲルは、
穴の開いた0.5mLマイクロチューブへ入れます。
それを1.5mLマイクロチューブへ入れて
遠心します。
ゲルが穴を通ってバラバラになり、
下の1.5mLマイクロチューブに集まります。
バラバラにしたゲルに
平衡化中性フェノールを加えて
よく混合させます。
－80℃で凍結して
ゲルマトリックス内部の水分を凍らせて
ゲルの構造を破壊します。
DNAはゲルマトリックスの間の水分子の間にあって、
中性条件ではフェノールよりも水によく溶けるので
凍ったゲルを室温で溶解すると、
水と一緒にゲルから外に出てきます。
水に溶けているDNAはアルコール沈殿を行い、
DNA沈殿させて得ることができます。
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みなさん、こんにちは。
今回の生化学実習はRNAの分離です。
まだ始まって２週目に入ったばかりですで、
春休み気分が抜けていないようです・・・。
長い撹拌時間では、
こんな感じですが、しっかり取り組んでいます。
それでは、今回の実習の流れをご紹介します。
RNAは細胞の中にありますので、
まずは細胞を壊し、遠心をします。
上清（赤い溶液の部分）をとり、
タンパク変性剤を加えて、撹拌します。
撹拌後、しばらく放置すると、層に分かれてきます。
これを遠心すると、３層に分離します。
ちょっとわかりづらいですが、
一番上に少し濁った白い上清、
真ん中に白い層（タンパク質が変性したもの）、
一番下に有機溶剤（タンパク質変性剤）の層ができます。
一番上の層（少し濁った白い液）に
アルコールを加えると、沈殿が生じてきます。
しばらく放置すると、沈殿が沈んできます。
これを遠心します。
遠心管の材質が白いので、
かなりわかりづらいですが、
遠心管の底に沈殿があります。
ちょっと濃い白色になってます。
この沈殿が、RNAになります。
最後にRNAを回収して乾燥して保存しました。
久しぶりの実習なので、
１回目（DNAの分離）、
２回目（RNAの分離）で肩慣らしをしていただきました。
来週から、酵素の実習になります。
２年生のみなさん、
マイクロピペットの操作になりますので、
しっかり取り組んでいきましょう。
～おまけ～
うっかりでしたが、
しっかりリカバリーしました。
さすが２年生ですね。
うっかり部分はご想像にお任せします。
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みなさん、こんにちは。
今回の２年生の生化学実習は、
ＤＮＡの定量を行いました。
使用したＤＮＡは、
４月の最初の実習で分離したＤＮＡです。
ＤＮＡの性質の確認と
得られたＤＮＡの濃度を求めました。
それでは、実習の様子をご覧ください。
最初に、得られたＤＮＡ溶液の
吸収スペクトルを作成しました。
ＤＮＡであれば、２６０nmに吸収があります。
グラフでは、ちょっとわかりづらいので、
データをリスト化しました。
波長２６０nmのときの吸光度が最も高いようです。
ＤＮＡの特徴を表していますね。
プリンターに接続をしていませんので、
２年生は、グラフの作成です。
これも練習ですね。
次にＤＮＡの定量を行いました。
今回はジフェニルアミン法で定量を行いました。
動物看護コースの２年生もピペット操作に慣れてきました。
ＤＮＡと試薬を混合させ、反応をさせます。
左側がＤＮＡ標準液、右側が得られたＤＮＡ溶液です。
青色の濃さの違いは、濃度の違いになります。
濃度が高ければ濃く、濃度が低ければ薄くなります。
反応終了後、分光光度計で測定をします。
ブログでは、順調に進んできましたが・・・・・。
反応があったりなかったりの班が登場しました。
原因は、試薬量を間違ったようです。
これも操作に慣れてきたころによくあるうっかりミスですね。
やり直しをして、しっかり結果を出しました。
今回の実習で、１期の生化学実習が終了です。
また２期から始まりますので、
１期の経験を活かして、頑張っていきましょう。
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みなさん、こんにちは。
前回の実習では、ＤＮＡの分離を行いました。
今回の生化学実習は、ＲＮＡの分離です。さて、今回もうまく分離できるでしょうか。
今回もバイオ通信、わんにゃん通信と分けてご紹介します。２コース分なので、すみません。
では、実習の様子をご紹介します。
ＤＮＡの分離と同じような操作になります。
まずは、ブタの肝臓を細かくしていきます。
次にホモジナイザーで細胞を壊していきます。
２回目なので、機器の取り扱いも慣れてきました。
ホモジナイザー後、遠心をします。ここまでは、ＤＮＡの分離と同様です。
遠心後、ＤＮＡでは沈殿が必要でしたが、今回は上清が必要になります。
上清に薬品を入れて、分離させていきます。
除タンパク操作です。前回と同様にフリフリしていきます。力が入ってますね。
振り終わったあとは、こんな感じです。使う薬品も少し違います。
この液を遠心します。さてどのように分離されるでしょう。
この続きは、わんにゃん通信「生化学実習３－２」でご紹介します。
引き続き、ご覧ください。
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みんさん、こんにちは。
｢わんにゃん通信・生化学実習１｣からの続きです。
生化学実習１からの続きで見ていただき、ありがとうございます。
生化学実習２からご覧の方は、わんにゃん通信・生化学実習１からご覧いただければ幸いです。
それでは、撹拌からのつづきです。
撹拌後、遠心をします。
遠心をすると３層に分かれます。
上から順に、水層(ＤＮＡ)→中間層(変性蛋白質)→クロロホルム層に分かれます。
水層(ＤＮＡ)を回収し、もう一度撹拌を行い、遠心をします。
３層に分かれます。中間層の変性蛋白質が少なくなっています。
水層(ＤＮＡ)をビーカーに丁寧に回収します。
そして、いよいよ水層(ＤＮＡ)に薬品をいれると、ＤＮＡが析出します。
ガラス棒に巻き付けて回収しました。
無事に、全班、ＤＮＡを分離できました。
今回の実習は、遠心操作も多く、ちょっと待ち時間が多かったので、待ち時間の様子も少しだけ。
２年生のみなさん、初回の実習から少し大変だったと思いますが、頑張っていきましょう。
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みなさん、こんにちは。
新学年が始まりました。
今回は、２年生の生化学実習の様子をご紹介します。
初回の実習は、｢ＤＮＡの分離｣です。
それでは、実習の様子をご覧ください。
初回の実習なので、多めに写真を撮りましたのご紹介します。
まずは、細胞をホモジナイザーで破砕していきます。
破砕後、遠心をしました。
上清を捨てて、沈殿に薬品を入れます。写真ではわかりませんが、少し粘性がでてきます。
これを遠心します。
ＤＮＡは、上清にあるので、上清を回収します。
慎重に慎重に回収をします。あまりに真剣だったので、多く写真を撮ってしまいました。
回収した上清に薬品を入れ、撹拌をします。この実習では一つのポイントになります。
頑張って撹拌しています。
撹拌後、遠心をします。
少し長くなってきましたので、この続きは、バイオ通信｢生化学実習２｣でご紹介します。
よろしければ、バイオ通信｢生化学実習２｣をご覧ください。
分離したＤＮＡは、どんな感じに見えるのかな？
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