みなさん、こんにちは。
前回のバイオコース２年生の生化学実習では、卵白アルブミンの分離を行いました。
今回は、分離した卵白アルブミンの定量を行いました。脱塩もしっかりできているようでした。
それでは、早速ですが、先ずは吸収スペクトルの作成を行いました。
少しわかりづらいですが、２８０ｎｍ付近に極大吸収波長があるようです。
２８０ｎｍは、タンパク質の極大吸収波長になります。
参考までにこちらは、ＤＮＡの吸収スペクトルです。
２６０ｎｍ付近に極大吸収波長があります。
次に卵白アルブミンの定量を行いました。
今回の定量方法は、ビウレット法です。
２年生にとっては、お馴染みの検量線法です。
今回も無事に卵白アルブミンの確認と定量を行うことができました。
２年生のみなさん、お疲れ様でした。
次回は、ゲルろ過クロマトグラフィーです。
頑張っていきましょう。
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みなさん、こんにちは。
今回のバイオコース２年生の生化学実習は、卵白アルブミンの定量を行いました。
この卵白アルブミンは、前回分離した卵白アルブミンです。
まずは、吸収曲線の作成をしました。
卵白アルブミンは、タンパク質なので、最大吸収波長は２８０ｎｍになります。
しっかり２８０ｎｍ付近に吸収が出ています。
次に卵白アルブミンの定量です。今回は、ビウレット法を用いました。アルブミン標準液の発色です。
各濃度によって、発色（紫色）具合が違います。一番左は、未反応です。
今回のサンプル（卵白アルブミン）の発色です。色の濃さの違いは、希釈倍率の違いです。
２年生ではお馴染みの検量線による定量です。
ＤＮＡの定量同様に、今回の卵白アルブミンの定量も無事に定量できました。
２年生のみなさん、一つの実験の流れとして、分離→定性・定量を忘れないようにしましょう。
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みなさん、こんにちは。
今回のバイオコース２年生の生化学実習では、卵白アルブミンの分離を行いました。
それでは、分離操作の様子をご紹介します。
まずは、卵白と卵黄に分けます。卵白をガーゼで濾します。
pH指示薬を加えます。若干緑色になっているのがわかりますか。
酸を加え、赤紫色に変化すると終了です。
写真では、わかりづらいですが、実際に学生もわかりづらかったようです。
学生に色の変化を伝えると、「えー！」と言ってました。
緑色っぽい色からの変化なので色判断は、なかなか難しかったようです。
今回の実習では、結構重要な操作なのですが・・・・・。
遠心をして、上清を回収します。
塩を加え、遠心をして、卵白に含まれるグロブリンを除去します。
上清にさらに塩を加えるとアルブミンが析出してきます。
塩濃度によって、グロブリンとアルブミンがそれぞれ析出してきます。
沈殿（アルブミン）を水に溶解して、透析を行いました。
透析後、今回分離したアルブミンの定量を行います。
タンパク質の性質がわかりやすい実習だと思いますので、２年生のみなさん、しっかり理解してくださいね。
次回は、アルブミンの定量の様子をご紹介します。
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