皆さん、こんにちは。
10/29に愛玩動物看護学科と応用生物科学科の1年生が
心肺蘇生法、止血法について学びました。
BLSとは、一次救命処置(Basic Life Support)のことで、
心配蘇生、AEDの使用、気道異物除去法などを指します。
救急救命学科の1年生からBLS、
今回はAEDの使用についてお届けします。
AED(Automated External Defibrillator)は、
自動体外式除細動器といい、
電気ショックが必要な場合には自動で充電を行って電気ショックを
AEDの使用が1分遅れるごとに7〜10％
心肺蘇生法と併せてAED使用方法について、
まず電源をONにして電極パッドを2枚貼ります。
音声に従って電気ショックを実施します。
負傷者に触れていると感電するリスクがあるため、
電気ショックが実施されたら、直ちに胸骨圧迫を開始します。
この作業を繰り返しながら救急車の到着を待ちます。
心肺蘇生法はいつどこで必要になるか分かりません。
目の前で人が倒れてもすぐに対応できるように
今回学んだことを覚えておいてほしいです。
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2年生の免疫化学実習では、モノクローナル抗体を作製しています。
今回はメンブレンの抗原と、保存していた培養上清(1次抗体)を反応させます。
前日にブロッキングをしたメンブレンを、短冊状に切ります。
パラフィルムを貼った容器へ、メンブレンを並べて反応を行います。
11枚のうち3枚はコントロールとして使います。
①1次抗体無し、2次抗体有り
②1次抗体無し、2次抗体無し
③1次抗体(陽性）必ず発色するものです。
残りのメンブレンは、保存した溶液(陽性になった培養上清)を1次抗体とします。
ELISAと同様に、
1次抗体→洗浄→2次抗体→基質→発色の反応を、
メンブレン上で行います。
洗浄はチューブに1枚ずつ入れて。。。
基質を入れて発色させます。
乾燥させたら、もとに戻して考察します。
左のメンブレンの結果を見てみると、
サンプル３は陽性コントロールです。
褐色のバンドが１つ見られます。
１つだけ反応しているので、｢モノクローナル抗体｣です。
サンプル９は褐色のバンドが複数見られるので、｢ポリクローナル抗体｣です。
もう一度クローニングをする必要があります。
目的のハイブリドーマを得るまでの道のりは遠い。。。
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2年生の免疫化学実習では、モノクローナル抗体を作製しています。
クローニングした細胞の培養上清を使って、ELISAを行います。
抗原の入っているELISAプレートと、細胞上清を対応させて移していきます。
ELISAを行い、抗体価の高い細胞上清を探します。
並行してウエスタンブロッティングを行います。
抗原をSDS-PAGE電気泳動で分離し、ゲル中の抗原をPVDF膜へを写し取ります。
ブロッティングが終わったPVDF膜は、
抗原と分子量マーカーの部分を切り離して、
アミドブラック染色します。
残りの部分は、ブロッキング液へ一晩漬けて、ブロッキングします。
ELISAで発色した培養上清は、マイクロチューブへ保存して、
ウエスタンブロッティングの1次抗体として使用します。
翌日、いよいよモノクローナル抗体ができているのかがわかります。
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2年生の免疫化学実習でモノクローナル抗体を作製しています。
抗体産生細胞とミエローマ細胞を細胞融合し、HAT培地で培養しました。
選択されたハイブリドーマの培養上清を使ってELISAを行います。
前日に抗原を添加してあるELISAプレートへBSAを入れてブロッキングします。
1時間のブロッキング後、PBSで洗浄します。
クリーンベンチ内で1次抗体(培養上清)を入れていきます。
培養プレートとELISAプレートの番号を対応させて上清を入れます。
96ウエルなので神経を使いますね。
1時間反応後、PBSで洗浄します。
ペルオキシダーゼで標識された2次抗体を入れ1時間反応させます。
PBSで洗浄後、基質を入れると発色してきます。
発色が濃いほど抗体価が高いことになります。
したがって、発色したウエルにいるハイブリドーマが目的の細胞ということです。
目的の細胞が決まったので、限界希釈法によるクローニングを行います。
培地へ96ウエルから細胞をピペッティングして集めます。
細胞浮遊液が出来たら、96ウエル細胞培養用プレートへ2滴づつ滴下していきます。
こうすると、1ウエルに細胞が1～数個の細胞が入ることになります。
上手く培養できますように。
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NPO法人 日本バイオ技術教育学会が主催する、
「バイオ技術者認定試験試験」が12/15(日)に実施されました。
午前の部は60問 （バイオ総論30問、生化学30問）
午後の部は90問 （微生物学30問、分子生物学30問、遺伝子工学30問）
合計150問です。
応用生物科学科2年生は中級を受験しました。
これまで準備してき力を発揮して～❣
いい結果になりますように(^^♪
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みなさん、こんにちは。
１年生の｢微生物学実習｣で、生菌数の測定を行いました。
まずは、滅菌生理食塩水を試験管に一定量ずつ分注していきます。
それを使って、菌液を段階希釈していきます。
希釈菌液から一定量分取し、平板に塗布して培養します。
培養後に形成されたコロニー数から、菌液中の生菌数を求めます。
計算もしっかりと覚えておきましょうね。
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みなさん、こんにちは。
今回の１年生の化学実習は、中和滴定を行いました。
１つずつ中和反応を確認しながら、アルカリ混液の定量を行いました。
それでは、実習の様子からご覧ください。
まずは、準備からですね。
初めて使用するビュレット。慣れないせいか、
コックをひねる感じがちょっと難しいようです。
最初のｐＨ指示薬は、フェノールフタレインです。
無色から紅色に変化したら終了です。
今回は、もう一つｐＨ指示薬としてメチルオレンジを使用しました。
メチルオレンジの変化です。黄色から赤色に変化したら終了です。
実際に見る色とｐＨ指示薬の変色域からイメージする色に
少し戸惑いがありましたが、アルカリ混液の測定までできました。
測定結果がでましたので、ここから計算です。
中和の公式を使って、アルカリ混液の定量を行います。
今回は、段階を経ての実習なので、混同しないように、
それぞれの測定値と中和反応を考えながら、計算をしていきます。
全員、アルカリ混液の定量はてきましたが、計算ミスが少し多かったような気がします。
１年生のみなさん、しっかりと計算していきましょうね。
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臨床検査技術学科２年生の遺伝子･染色体検査学演習で、
１日目はPCRでDNA断片を増幅しました。
２日目は増幅したDNA断片のアガロースゲル電気泳動を行います。
アガロースゲルのサンプル溝へサンプルを
アプライするのは初めてなので、練習してから行いました。
take先生がポイント解説してくれました。
視線が熱くて余計に緊張する？
その調子！
班員も見守ります。
マイクロチューブからサンプルを取り
静かにアガロースゲルへアプライします。
手は固定してぶれないようにします。
100Vで30分程泳動後、染色してからDNAのバンドを確認します。
Aクラスも上手くDNAが増幅できていたようです。
細かい作業ですけれど慣れてくださいね。
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臨床検査技術学科２年生の遺伝子･染色体検査学演習で
１日目にはPCRを行いました。
２日目はアガロースゲル電気泳動により、増幅したDNA断片を分離し確認します。
サンプルのアプライを余りのアガロースゲルを使って練習します。
手がぶれないように固定するとやり易いです。
班員に見守られながら。。。
慎重に。。。
Aクラスの皆さんの真剣な様子です。
泳動後はアガロースゲルを染色します。
染色後、UVトランスイルミネーター上で観察します。
今回は３種類の大きさのDNA断片を増幅しました。
バンドがしっかりと確認できています。
成功ですね。
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みなさん、こんにちは。
いよいよ４期も始まり、２年生のバイオインフォマティクスの授業も始まりました。
バイオインフォマティクスとは、バイオ(生物学)と
インフォマティクス(情報学)が融合した造語です。
いままで実習でよく使っていたマイクロピペットをコンピュータに変えて、
バイオ関連のサイトでツールを使って、
基本的なバイオインフォマティクスの分野を学んでいきます。
初回の今回、２年生が最初に困ったことは、
バイオ関連のサイトはほとんど英語だということです。
２年生のみなさん、少しずつ慣れていきましょうね。
今回の授業では、バイオ関連サイトの紹介と塩基配列の取得を実施してみました。
今年の２年生は、いつもよりすんなり取得ができたようです。
英語に少し抵抗があったようですが、ツールを使う上では、
それほど問題はなかったようです。
２年生のみんさん、これからいろいろなサイトを見ていきますので、
今まで勉強してきたことを振り返りながら頑張っていきましょう。
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