バイオ通信No.1084 「プラスミドの調製」
1年生の遺伝子操作学実習でプラスミドを調製しました。
今回はボイル法により大腸菌からプラスミドを取り出します。
リゾチームを加えて煮沸します。
これにより、宿主菌である大腸菌の細胞壁を破壊します。
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遠心すると、変性した菌体のタンパク質や染色体DNAが沈殿になります。
それを、楊枝でつり上げて。。。
ポイッと捨てます。残った溶液中にはプラスミドが含まれています。
イソプロパノールと酢酸ナトリウムを加えると。。。
アルコール沈殿といいます。
モヤッとＤＮＡが析出して見えます(^_^)v
遠心してプラスミドを集めます。
白い沈殿がプラスミド（DNA）です！
沈殿を乾燥させてTEに溶解します。
RNAを除去してからアガロースゲル電気泳動にてDNAを確認します。
きれいに泳動できました♡
