バイオ通信 No.2872「遺伝子工学実習２」

2年生の遺伝子工学実習で 「ゲルからのDNA断片の回収」を行いました。   アガロースゲル電気泳動を行います。   サンプルは 制限酵素で切断した プラスミドDNAです。   サンプルのアプライは慎重に。 手がぶれないように固定します。   電気泳動後に目的のバンドを ゲルバンドカッターで切り取ります。   本番前に練習してから。   アガロースゲルを染色後、 トランスイルミネーター上にのせます。   紫外線を当てながら 目的のバンドを切り取ります。   切り取ったゲルは、 穴の開いた0.5mLマイクロチューブへ入れます。   それを1.5mLマイクロチューブへ入れて 遠心します。   ゲルが穴を通ってバラバラになり、 下の1.5mLマイクロチューブに集まります。   バラバラにしたゲルに 平衡化中性フェノールを加えて よく混合させます。   －80℃で凍結して ゲルマトリックス内部の水分を凍らせて ゲルの構造を破壊します。   DNAはゲルマトリックスの間の水分子の間にあって、 中性条件ではフェノールよりも水によく溶けるので 凍ったゲルを室温で溶解すると、 水と一緒にゲルから外に出てきます。   水に溶けているDNAはアルコール沈殿を行い、 DNA沈殿させて得ることができます。   ↓↓クリックお願いします