臨床化学実習～酵素濃度［E］の測定

Wです。 疾患との関係で測定される血清酵素を『臨床酵素』といい、 疾患部位や細胞傷害の程度の指標となります。 酵素はタンパク質からなる生体内触媒ですが タンパク質量としては微量なので反応速度（≒活性、触媒能）を利用して測定します。   実習では酵素液［異常高値のコントロール血清を段階的に希釈］の 反応初速度Ｖ（≒Ｖmax）と酵素濃度［Ｅ］の関係を調べました。 ●比例することから、０次反応条件（［Ｓ］≫Ｋm）下では V（≒Vmax)を測定することにより［E］の定量ができることを確認しました。 写真の酵素反応速度測定装置［恒温セルを有する分光光度計にレコーダーを接続］ を用いてALP（アルカリホスファターゼ）の初速度を測定しました。 ４-ニトロフェニルリン酸を基質とする方法で４-ニトロフェノールの 生成速度（ΔAbs405／min）とモル吸光係数から酵素濃度［U/L］を計算しました。 酵素の反応速度は測定条件により変動するため 酵素項目も標準化（測定値の共通化）により JSCC（日本臨床化学会）標準化対応試薬と検量用酵素標準物質により JSCC常用基準法の測定値に換算（正しく伝達）されています。   人気ブログランキング