臨床化学実習～タンパク質

Wです。 タンパク質の測定を行いました。 ①総タンパク（TP）　Biuret法 ＜キレート比色法＞ ②アルブミン（ALB）   BCG法 ＜色素結合法・pH指示薬のタンパク誤差を利用＞ ③A/G比　　　　　 A/G＝ALB／(TP－ALB)　＜TP＝ALB＋GLOBより計算＞ 病気になってもALBは減少（栄養不足）し、GLOBは増加（免疫増強）して TPは変化しない場合もありますがA/G比を計算すると低値となります。 例えば　肝硬変症（合成低下）やネフローゼ症候群（尿中漏出）ではALB減少により低値、多発性骨髄腫（形質細胞の癌化により異常な抗体が産生）ではGLOB増加により低値となります。A/G比が増加するのは免疫不全症候群（免疫グロブリン欠損）です。 今回は試薬調製について紹介します。イオン交換水（5/15に紹介）を使用しました。 ①アルブミン標準液　 ヒト由来＜HSA＞は高価なためウシ由来＜BSA＞を使用 軽いのでかなり量があります。発砲させると変性するので気長に溶かします。 ビーカーの液面に薄く捲いて溶かすことを繰り返します。最後は標準液なので メスフラスコでメスアップし、転倒混和して完成です。 ②BCG呈色試薬のクエン酸緩衝液（pH４.２） クエン酸とクエン酸Naを準備してpHメータ＜イオン選択電極法＞で pHをモニタ－しながら両者を混合してpH４.２の緩衝液を調製しました。 pH指示薬のタンパク誤差を測定原理とするため正確なpHが求められます。 最後に検体と呈色反応の色調（検量線）を紹介します。 左から　検体①血漿（EDTA-2K加）　②血清　③溶血血清 黄色透明は生体色素ビリルビンの色、溶血の赤は血色素ヘモグロビンの色 Biuret法の呈色 BCG法の呈色 血糖測定と同様に濃度既知の標準液で検量線を作成し、未知濃度検体の濃度を　　　　　　　　　　　　　　求めました。　タンパク質の測定原理は酵素的測定法ではありませんよ。   人気ブログランキング